Результаты поиска

Нашлось результатов: 25841 (0,82 сек )

Свободный доступ

Ограниченный доступ

Уточняется продление лицензии

1

БЕЛКОВЫЕ ИНГИБИТОРЫ ПРОТЕОЛИТИЧЕСКИХ ФЕРМЕНТОВ АВТОРЕФЕРАТ ДИС. ... ДОКТОРА БИОЛОГИЧЕСКИХ НАУК

Цель настоящей работы - исследование тонких механизмов реакции протеаза-ингибитор. Крайне важны как с теоретической, так и с практической точки зрения, представляется изучение биологических функций ингибиторов протеолиза, особенно у высших растений, а также изучение возможностей использования иммобилизованных белковых ингибиторов в качестве биоспецифических сорбентов для выделения протеолитических ферментов из различных объектов методом аффинной хроматографии

Однако повторная обра­ ботка фермепта уксусным ангидридом приводит к полной инактивации . <...> Значение остатков, образудди каталитический центр ферментов . <...> Свободный фермент 2. Фермент + экстракт 3. Фермент * злгат рН 7,6 4. <...> процессе ввделения или.хра-нения.может:приводить.к образованию модифицированных форм фер­ ментов или к их инактивации <...> (Oteuka ,Price, I974;Prlngle . ,. 1975) В лабораторной:практике для инактивации сопутствующих протеаз

Предпросмотр: БЕЛКОВЫЕ ИНГИБИТОРЫ ПРОТЕОЛИТИЧЕСКИХ ФЕРМЕНТОВ.pdf (0,0 Мб)

2

ПЕПТИДЫ И ИХ ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ С АМИНОАЦИЛ-РНК СИНТЕТАЗАМИ АВТОРЕФЕРАТ ДИС. ... КАНДИДАТА БИОЛОГИЧЕСКИХ НАУК

М.: МОСКОВСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ ИМЕНИ М. В. ЛОМОНОСОВА

Выводы. 1. Ферментативное гидролизаты различных белков оказывают стимулирующее действие на рост микроорганизма Z. cassi . Размер стимулирующего действия зависит как от вида белка, так и от природы фермента, осуществляющего гидролиз.

Реакция идет по следующей схеме. фермент + АТ9*И0ОС-СН(Шл)-R ^ * фермент -АМР-ОС-ЩМ)-/? <...> JpH-5-фермента j дейцина/мд 1 j до инкуба;после ин;ГидролизЯ I ! <...> Т2 паратами активирующих ферментов . <...> /влияние концентрации субстрата, фермента , АТ$ и Мч, субстратная специфичность/. <...> "Природа пептидаз, содержащихся в препаратах рН-5 ферментов из печени крысы".

Предпросмотр: ПЕПТИДЫ И ИХ ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ С АМИНОАЦИЛ-РНК СИНТЕТАЗАМИ.pdf (0,0 Мб)

3

ВЫДЕЛЕНИЕ И ХАРАКТЕРИСТИКА САЙТ-СПЕЦИФИЧЕСКИХ ЭНДОНУКЛЕАЗ РЕСТРИКЦИИ ИЗ ЦИАНОБАКТЕРИИ В НОРМЕ И ПРИ ВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ АВТОРЕФЕРАТ ДИС. ... КАНДИДАТА БИОЛОГИЧЕСКИХ НАУК

ОРДЕНА ЛЕНИНА И ОРДЕНА ДРУЖБЫ НАРОДОВ АКАДЕМИЯ НАУК УКРАИНСКОЙ ССР

Целью нашей работы было изучение некоторых аспектов взаимодействия вирулентного цианофага N-2 с клетками гетероцистной нитчатой цианобактерии Nortoc linckia, шт. Rlenk 387/7. При этом основное внимание было уделено изучению клеточных и вирусиндуцированных ферментов рестрикции и энзиматического гидролиза ДНК хозяина в процессе инфекции.

Однако проблема поиска новых ферментов не потеряла своей актуаль­ ности. <...> Определить сайты узнавания и точку разрезания очищенных ферментов рестрикции. 4. <...> Установлены сайты узнавания, а для фермента Nil 387/7 I - точка разрезания. <...> и 0,7-0,82 М NaCl для друго­ го фермента . <...> "Методы получения, анализа и применения ферментов " . Юрмала, 1990. С. 4 2 . 5 . Мельник.А.И.

Предпросмотр: ВЫДЕЛЕНИЕ И ХАРАКТЕРИСТИКА САЙТ-СПЕЦИФИЧЕСКИХ ЭНДОНУКЛЕАЗ РЕСТРИКЦИИ ИЗ ЦИАНОБАКТЕРИИ В НОРМЕ И ПРИ ВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ.pdf (0,0 Мб)

4

Т-ЛИМФОЦИТЫ В ВОССТАНОВЛЕНИИ ВОСПРОИЗВОДИТЕЛЬНОЙ ФУНКЦИИ У КОРОВ ПОСЛЕ ОТЕЛА АВТОРЕФЕРАТ ДИС. ... КАНДИДАТА БИОЛОГИЧЕСКИХ НАУК

ВСЕРОССИЙСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬ

Целью данной работы было определение возможного существования у Т-лимфоцитов крупного рогатого скота прямой антибактериальной активности к внеклеточным патогенам; изучение иммунопротективной роли Т-лимфоцитов в восстановлении репродуктивной функции у коров после отела, а также выяснение возможности сокращения времени восстановления этой функции посредством активации местного иммунитета тканей матки.

первого осеменения чис­ ло 7 6 % 50.0±13,3 40,1±12,6 за 90 сут. чис­ ло 12 11 % 85,8±9,3 73,3111,4 "инактивация <...> первого осеменения чис­ ло 23 16 % 53,5±7,6 42,1±8,0 за 90 сут. числ о 39 23 % 90,7±4,4* 71,1 ±7,4* инактивация

Предпросмотр: Т-ЛИМФОЦИТЫ В ВОССТАНОВЛЕНИИ ВОСПРОИЗВОДИТЕЛЬНОЙ ФУНКЦИИ У КОРОВ ПОСЛЕ ОТЕЛА.pdf (0,0 Мб)

5

РАЗРАБОТКА НОВЫХ СПОСОБОВ СТАБИЛИЗАЦИИ И КОНТРОЛЯ ВИН АВТОРЕФЕРАТ ДИС. ... ДОКТОРА ТЕХНИЧЕСКИХ НАУК

ВСЕСОЮЗНЫЙ ОРДЕНА ТРУДОВОГО КРАСНОГО ЗНАМЕНИ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ ВИНОДЕЛИЯ И ВИНОГРАДАРСТВА "МАГАРАЧ"

Цель работы. Методологически решение проблемы стабилизации вин основывалось на системном подходе в оценка потенциальной неустойчивости вин к отдельный видам помутнений и к их комплексному проявлении с последующей разработкой из этой базе новых методов стабилизации вин.

1967), на Все­ союзном созецанип по биосинтезу ферментов микроорганизмами и применении их в народном <...> При содержании калеза в среде 20-30 мг/д активность фермента снигаегся наполовину. <...>ферментов . <...> В теченио 21 дня непре­ рывной работы реактора активность фермента снизилась вдвое. <...> А.С. 536192 (СССР) Способ иммобилизации ферментов (Павлен­ ко H.

Предпросмотр: РАЗРАБОТКА НОВЫХ СПОСОБОВ СТАБИЛИЗАЦИИ И КОНТРОЛЯ ВИН.pdf (0,0 Мб)

6

В -ГЛЮКОЗИДАЗЫ ГРИБА GEETRIOHWIS CAADIDNE ЗС АВТОРЕФЕРАТ ДИС. ... КАНДИДАТА БИОЛОГИЧЕСКИХ НАУК

М.: АКАДЕМИЯ НАУК СССР ОРДЕНА ЛЕНИНА ИНСТИТУТ БИОХИМИИ ИМЕНИ А. Н. БАХА

Цель и задачи исследования. Целью настоящей работы явилось изучение множественных форм b-глюкозидазы в промышленном ферментном препарате "Целлокандин I 10x", полученном из фильтрата культуральной жидкости целлюлозоразрушающего гриба Geo trichura oandidum ЗС.

лекуле фермента , состав углеводного компонента молекулы. <...> Выход фермента составил около 9% по активности и 0,13? по белку. <...> Выделенный фермент является тихагсноя /3 -гдюг.озидазо£: фермент не расцеплял полисахарида (арабогдЕзуроЕоксилан <...> Втсроо Бсесэязн. соьощ. ло ферментам гакроррганизмов. Минск, 1978, октябрь, тез. докл., с. 76. 4. <...> "Методы получения ьысокоочищеняых ферментов ". -Вильнюс, 1973, тоэ. докл., с.94-95. 5.

Предпросмотр: В -ГЛЮКОЗИДАЗЫ ГРИБА GEETRIOHWIS CAADIDNE ЗС.pdf (0,0 Мб)

7

ЭФФЕКТИВНОСТЬ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ БИОХИМИЧЕСКИХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ КРОВИ ПРИ ОЦЕНКЕ ПЛЕМЕННЫХ КАЧЕСТВ БАРАНОВ КАРАКУЛЬСКОЙ ПОРОДЫ АВТОРЕФЕРАТ ДИС. ... КАНДИДАТА СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ НАУК

ВСЕСОЮЗНЫЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ ЖИВОТНОВОДСТВА

Цель настоящего исследования - разработка научно-обоснованного способа оценки баранов каракульской породы по качеству потомства путем отбора животных по биохимической их индивидуальности.

Досле определения активности ферментов Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис» ь. <...> Из них 6 голов с высокой активностью фермента аспартат-аминотрансферазы, 6 голов со средней и 6 голов <...> Активность ферментов крови баранов зависила и от возраста ЗЕВОТНЫХ. <...> Активность ферментов 1Сумма нукяев" ? <...> Лнтерьерные признаки развития каракульских овец, к каким могут быть отнесены интикнисгь ферментов аспартат

Предпросмотр: ЭФФЕКТИВНОСТЬ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ БИОХИМИЧЕСКИХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ КРОВИ ПРИ ОЦЕНКЕ ПЛЕМЕННЫХ КАЧЕСТВ БАРАНОВ КАРАКУЛЬСКОЙ ПОРОДЫ.pdf (0,0 Мб)

8

СОВМЕСТИМОСТЬ ГЕНОМОВ НЕКОТОРЫХ ВИДОВ ТЕТРАПЛОИДНОЙ И ТЕКСАПЛОИДНОЙ ПШЕНИЦЫ С ЦИТОПЛАЗМОЙ T. TIMOPHEEVI АВТОРЕФЕРАТ ДИС. ... КАНДИДАТА БИОЛОГИЧЕСКИХ НАУК

М.: МОСКОВСКАЯ ОРДЕНА ЛЕНИНА И ОРДЕНА ТРУДОВОГО КРАСНОГО ЗНАМЕНИ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННАЯ АКАДЕМИЯ ИМЕНИ К. А. ТИМИРЯЗЕВА

Задачи: 1. Изучить совместимость геномов некоторых видов гексаплоидной и тетраплоидной пшеницы с цитоплазмой Т. timopheevi и при этом постараться вычленить эффект, взаимодействия самих геномов; 2. Изучить мейоз и микроспорогенез у фертильных форм и форм, полученных от скрещивания; ЦМС-линия Х вид. 3. Провести цитохимическое изучение генеративных органов фертильных форм и их стерильных аналогов (в случае стерилизующего действия цитоплазмы Т. timopheevi) у некоторых видов пшеницы.

1,0 1,5 2,0 1,0. 1,5 1,2 1,1 Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис» Активность ферментов <...>Ферменты . <...>ферментов . <...> Активность ферментов -определяли в пыльце, завязи и рыльце. Пероксидаза. <...> Уменьшение содержания ряда веществ и ферментов в завязях и рыльцах пестиков стерильных форм пшеницы является

Предпросмотр: СОВМЕСТИМОСТЬ ГЕНОМОВ НЕКОТОРЫХ ВИДОВ ТЕТРАПЛОИДНОЙ И ТЕКСАПЛОИДНОЙ ПШЕНИЦЫ С ЦИТОПЛАЗМОЙ T. TIMOPHEEVI.pdf (0,0 Мб)

9

СРАВНИТЕЛЬНЫЕ ДАННЫЕ ОБ АКТИВНОСТИ НЕКОТОРЫХ ГЛИКОЛИТИЧЕСКИХ ФЕРМЕНТОВ В СПЕРМЕ БЫКА И ХРЯКА АВТОРЕФЕРАТ ДИС. ... КАНДИДАТА БИОЛОГИЧЕСКИХ НАУК

ЛЬВОВСКИЙ ЗООВЕТЕРИНАРНЫЙ ИНСТИТУТ

В данной работе представлены результаты сравнительных исследовании активности аденозинтрифосфатазы, фосфогексоизомеразы, фосфоглюкомутазы, альдолазы и фруктозо-1,6-дифосфатазы в сперме быка и хряка, а также влияние режима половой эксплуатации производителей на активность изучаемых ферментов.

Размещение ферментов между половыми клетками и плазмой также не оди­ наково. <...> Этот фермент у обоих видов животных на­ ходится в спермиях. <...> (Р фермента снижалось. <...> Высокое содержание фермента АТФ-азы в 10 . <...> Влияние инсулина на активность некоторых ферментов спермы быка.

Предпросмотр: СРАВНИТЕЛЬНЫЕ ДАННЫЕ ОБ АКТИВНОСТИ НЕКОТОРЫХ ГЛИКОЛИТИЧЕСКИХ ФЕРМЕНТОВ В СПЕРМЕ БЫКА И ХРЯКА.pdf (0,0 Мб)

10

ВЫЯВЛЕНИЕ И НЕКОТОРЫЕ ОСОБЕННОСТИ ПРОТЕОЛИТИЧЕСКОГО КОМПЛЕКСА АКТИНОМИЦЕТОВ АВТОРЕФЕРАТ ДИС. ... КАНДИДАТА БИОЛОГИЧЕСКИХ НАУК

Цели работы. Настоящая работа и посвящена, изучению некоторых особенностей протеолитического комплекса актиномицетов

.; :," Эти ферменты играют важнейшую регуляторную роль в коор­ динации кругооборота { распад £г=5 синтез <...> ";. "Источниками ферментов олужидиь ""v7 ;>^ ".;"." -" . <...> Предварительную очистку молокосвартывашщего фермент ­ ного комплекса проводили по общепринятому методу <...> Оптимальное значение рН для проявления " .-.: активности фермента . . " " " " " " . <...> актиноми-.;..^ цехов, как и подобные ферменты других микроорганизмов, имели более широкие интервалы

Предпросмотр: ВЫЯВЛЕНИЕ И НЕКОТОРЫЕ ОСОБЕННОСТИ ПРОТЕОЛИТИЧЕСКОГО КОМПЛЕКСА АКТИНОМИЦЕТОВ.pdf (0,0 Мб)

11

БИОЛОГИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ ДЕРНОВО-ПОДЗОЛИСТЫХ ПОЧВ И ЕЕ ИЗМЕНЕНИЕ ПОД ВЛИЯНИЕМ ТОРФОМИНЕРАЛЬНЫХ СМЕСЕЙ АВТОРЕФЕРАТ ДИС. ... КАНДИДАТА СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ НАУК

БЕЛОРУССКАЯ ОРДЕНА ТРУДОВОГО КРАСНОГО ЗНАМЕНИ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННАЯ АКАДЕМИЯ

БИОЛОГИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ ДЕРНОВО-ПОДЗОЛИСТЫХ ПОЧВ И ЕЕ ИЗМЕНЕНИЕ ПОД ВЛИЯНИЕМ ТОРФОМИНЕРАЛЬНЫХ СМЕСЕЙ

Зависимость активности ферментов почв от условий среды Активность ферментов зависит от,целого ряда факто <...> В этом находит свое проявление од­ но из характерных свойств ферментов -лабильность. <...> Од­ нако, если для ферментов организма эти зависимости вы­ яснены, довольно полно, то для почвенных ферментов <...> Условия среды оказывают значительное влияние на активность ферментов " в почве. <...> Наоборот, снижение влажности почвы ведет к уменьшению активности ее ферментов .

Предпросмотр: БИОЛОГИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ ДЕРНОВО-ПОДЗОЛИСТЫХ ПОЧВ И ЕЕ ИЗМЕНЕНИЕ ПОД ВЛИЯНИЕМ ТОРФОМИНЕРАЛЬНЫХ СМЕСЕЙ.pdf (0,0 Мб)

12

ФИЗИОЛОГИЧЕСКОЕ ОБОСНОВАНИЕ СОЧЕТАНИЯ ВНЕКОРНЕВОЙ ПОДКОРМКИ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ РАСТЕНИЙ С ИХ ХИМИЧЕСКОЙ ПРОПОЛКОЙ (НА ПРИМЕРЕ КУКУРУЗЫ И ПРОСА) АВТОРЕФЕРАТ ДИС. ... КАНДИДАТА БИОЛОГИЧЕСКИХ НАУК

Мы предприняли попытку изучить физиологические основы сочетания внекорневой подкормки сельскохозяйственных растений с их химической прополкой в тесной связи с вопросами биохимии, биофизики и растениеводства. Настоящая диссертационная работа посвящена вопросам теории и практики совместного использования минеральных (удобрений и гербицидов в посевах кукурузы и проса.

13,9 14,8 Л« 100 135,1 143.3 152.6 Опыты показали также возрастание активности других ды­ хательных ферментов <...> В наших опытах интенсивности дыхания соответствовала, как правило, активность окислительных ферментов <...> В даль-: нейшем активность этих ферментов повышается: Добавление азотного удобрения в раствор гербицида <...> смягчает инициирую­ щее действие 2,4-дихлорфеноксиуксусной кислоты на деятель­ ность окислительных ферментов <...> растений: "водообмен, фо­ тосинтез, синтез фитохромов, дыхание и активность некоторых окислительных ферментов

Предпросмотр: ФИЗИОЛОГИЧЕСКОЕ ОБОСНОВАНИЕ СОЧЕТАНИЯ ВНЕКОРНЕВОЙ ПОДКОРМКИ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ РАСТЕНИЙ С ИХ ХИМИЧЕСКОЙ ПРОПОЛКОЙ (НА ПРИМЕРЕ КУКУРУЗЫ И ПРОСА).pdf (0,0 Мб)

13

НЕКОТОРЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ УГЛЕВОДНОГО ОБМЕНА У КУР В ЗАВИСИМОСТИ ОТ ВОЗРАСТА И ФИЗИОЛОГИЧЕСКОГО СОСТОЯНИЯ ОРГАНИЗМА АВТОРЕФЕРАТ ДИС. ... КАНДИДАТА БИОЛОГИЧЕСКИХ НАУК

ХАРЬКОВСКИЙ ЗООВЕТЕРИНАРНЫЙ ИНСТИТУТ

В данной работе представлены результаты исследований некоторых сторон углеводного метаболизма у кур русской белой породы в конце эмбриогенеза и в течение сравнительно продолжительного периода их постнатального онтогенеза.

Возрастная-динамика содержания, главнейших углевод­ ных метаболитов и активность ферментов углеводного <...> Особенно мало ис­ следован обмен углеводов в яйцеводе, а также активность соответствующих ферментов в <...> Активность ферментов выражалась в мкг фосфора на 100 мг ткани. <...> Так, в период эмбриогенеза активность фермента сравнитель­ но низкая. <...> Известно,. что данный фермент играет роль и в синтезе, гликогена./. .

Предпросмотр: НЕКОТОРЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ УГЛЕВОДНОГО ОБМЕНА У КУР В ЗАВИСИМОСТИ ОТ ВОЗРАСТА И ФИЗИОЛОГИЧЕСКОГО СОСТОЯНИЯ ОРГАНИЗМА.pdf (0,0 Мб)

14

ПРИЁМЫ ХИМИЧЕСКОЙ ИММУНИЗАЦИИ ТАБАКА К ЧЁРНОЙ КОРНЕВОЙ ГНИЛИ АВТОРЕФЕРАТ ДИС. ... КАНДИДАТА БИОЛОГИЧЕСКИХ НАУК

ХАРЬКОВСКИЙ ОРДЕНА ТРУДОВОГО КРАСНОГО ЗНАМЕНИ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫЙ ИНСТИТУТ ИМЕНИ В. В. ДОКУЧАЕВА

ПРИЁМЫ ХИМИЧЕСКОЙ ИММУНИЗАЦИИ ТАБАКА К ЧЁРНОЙ КОРНЕВОЙ ГНИЛИ

Предпосевная обработка.активизирует ферменты VV в растениях,"что"положительно сказывается "на протекании <...> При поражении черной корневой гнилью налицо изме­ нение активности дыхательных ферментов " в растениях

Предпросмотр: ПРИЁМЫ ХИМИЧЕСКОЙ ИММУНИЗАЦИИ ТАБАКА К ЧЁРНОЙ КОРНЕВОЙ ГНИЛИ.pdf (0,0 Мб)

15

ГЛИКОГЕНФОСФОРИЛАЗА МЫШЦ КРОЛИКА - ЧЕТВЕРТИЧНАЯ СТРУКТУРА И РЕГУЛЯТОРНЫЕ СВОЙСТВА АВТОРЕФЕРАТ ДИС. ... ДОКТОРА БИОЛОГИЧЕСКИХ НАУК

М.: ОРДЕНА ЛЕНИНА ИНСТИТУТ БИОХИМИИ ИМЕНИ А. Н. БАХА

В настоящем исследовании ставились, в основном, следующие задачи. 1. Изучение условий диссоциации фосфорилаз Б и А из мышц кролика на субъединицы с целью получения дополнительной информации о четвертичной структуре фермента, свойствах субъединиц и характере связей между ними. 2 . Выяснение вопроса об участии пиридоксаль-5-фосфата в поддержании четвертичной структуры фосфорилазы.

Фосфорилаза относится к классу регуляторных ферментов , обладающих ". . четвертичной структурой. <...> Это цоает объяснять­ ся специфическим влиянием цистеина на структуру фермента . <...> Третий тип слоев наблюдается в основном на свекоприготовленных препаратах фермента . <...> Индуцированная оптическая активность некото­ рых пиридоксалевых ферментов . <...> Химическая модификация ферментов как один из путей регуляции их активности.

Предпросмотр: ГЛИКОГЕНФОСФОРИЛАЗА МЫШЦ КРОЛИКА - ЧЕТВЕРТИЧНАЯ СТРУКТУРА И РЕГУЛЯТОРНЫЕ СВОЙСТВА.pdf (0,0 Мб)

16

Проведено исследование кинетики термоинактивации глутатионпероксидазы типа I - фермента, играющего ключевую роль в системе антиоксидантной защиты организма. Показано, что при температуре 37° С олигомерная глутатионпероксидаза инактивируется по мономолекулярному механизму. Предложен эффективный способ стабилизации фермента при помощи полиэлектролитов разной природы.

Именно при этом значении рН были исследованы кинетические закономерности инактивации фермента , которые <...> <...> Установлено, что в присутствии 1-, 10и 100-кратных избытков указанных выше полимеров инактивация фермента <...> <...>

17

ИЗУЧЕНИЕ МЕХАНИЗМА ФОТОДИНАМИЧЕСКОЙ ИНАКТИВАЦИИ ФЕРМЕНТОВ АВТОРЕФЕРАТ ДИС. ... КАНДИДАТА БИОЛОГИЧЕСКИХ НАУК

Цель настоящего исследования заключалась в экспериментальной проверке этого предположения, доказательстве существования скрытых повреждений белкового субстрата при ФДЭ, изучении их природы и вклада в общее поражение, а также в изучении эффективности фотодинамического поражения белков (квантового выхода), вопроса практически не разработанного, тем не менее важного для выяснения как механизма фотодинамической реакции клетки, так и структурных особенностей белкового субстрата

<...> КОНДАКОВА Изучение механизма фотодинамической инактивации ферментов А в т о р е ф е р а т диссертации <...> Освещение растворов миозина с метиленовой синью на воздухе приводит к инактивации фермента по закону, <...> Восстановление окраски сопровождается частичной инактивацией фермента («кислородное» последействие) в <...> С этой целью изучались лозовые зависимости инактивации ферментов в большом диапазоне их концентраций:

Предпросмотр: ИЗУЧЕНИЕ МЕХАНИЗМА ФОТОДИНАМИЧЕСКОЙ ИНАКТИВАЦИИ ФЕРМЕНТОВ.pdf (0,0 Мб)

18

ИЗУЧЕНИЕ МЕХАНИЗМА ЛУЧЕВОЙ ИНАКТИВАЦИИ ФЕРМЕНТОВ АВТОРЕФЕРАТ ДИС. ... ДОКТОРА БИОЛОГИЧЕСКИХ НАУК

М.: ИНСТИТУТ БИОЛОГИЧЕСКОЙ ФИЗИКИ АКАДЕМИИ НАУК СССР

Из сопоставления и анализа результатов, приведенных в диссертации, двухэтапный процесс лучевой инактивации ферментов представляется следующим образом (глава 13). На первом этапе инактивации происходит перераспределение электронного заряда в белковой молекуле с образованием и локализацией электронной вакансии.

Э И Д У С ИЗУЧЕНИЕ МЕХАНИЗМА ЛУЧЕВОЙ ИНАКТИВАЦИИ ФЕРМЕНТОВ Автореферат диссертации на соискание ученой <...> Э Й Д У С ИЗУЧЕНИЕ МЕХАНИЗМА ЛУЧЕВОЙ ИНАКТИВАЦИИ ФЕРМЕНТОВ Автореферат диссертации на соискание ученой <...> Таким образом, для инактивации ферментов как при «косвен­ ном», так и при «прямом» действии радиации <...> (Скрытые повреждения при лучевой инактивации ферментов ). <...> Участие кислорода в лучевой инактивации сухих ферментов . Радиобиология. 4, 44. Эйдус Л. X. 1964.

Предпросмотр: ИЗУЧЕНИЕ МЕХАНИЗМА ЛУЧЕВОЙ ИНАКТИВАЦИИ ФЕРМЕНТОВ.pdf (0,0 Мб)

19

Резюме. Устойчивость к антибиотикам среди микроорганизмов семейства Enterobacteriaceae обусловлена комбинацией нескольких механизмов, например, гиперпродукцией бета-лактамаз, снижением проницаемости внешней мембраны микробной клетки (обычно это связано с утратой пориновых белков), наличием системы эффлюкса. Особого внимания заслуживают металло-бета-лактамазы (МБЛ), наличие которых обуславливает устойчивость грамотрицательных микроорганизмов ко всем бета-лактамным антибиотикам (в некоторых случаях, кроме азтреонама). В настоящее время нет ингибиторов МБЛ карбапенемрезистентных микроорганизмов, разрешенных для применения в клинике. Поиск эффективных ингибиторов МБЛ карбапенемрезистентных микроорганизмов, разрешенных к применению в клинике и усиливающих действие карбапенемов, послужил основанием для выполнения данного исследования. Работу проводили в 3 этапа: 1) создание модельной системы с использованием стандартного реактива фермента металло-бета-лактамазы P. aeruginosa рекомбинантной, экспрессированной в E. coli, для оценки повышения минимальных подавляющих концентраций (МПК) карбапенемов в отношении ранее чувствительных к ним штаммов грамотрицательных микроорганизмов in vitro; 2) оценка эффективности перспективных ингибиторов МБЛ в присутствии того же стандартного реактива фермента; 3) оценка способности выявленных ингибиторов усиливать действие карбапенемов в отношении клинических изолятов грамотрицательных микроорганизмов, продуцирующих МБЛ, по показателям МПК и индекса фракционной ингибирующей концентрации (ФИК). Стандартный метод «шахматной доски» модифицировали для оценки сочетанного применения антибиотика из группы карбапенемов и потенциального ингибитора МБЛ - лекарственного препарата из группы бисфосфонатов - этидроновой кислоты. С использованием стандартного реактива фермента металло-бета-лактамазы P. aeruginosa рекомбинантной, экспрессированной в E. coli, создали модельную систему, которая позволяет оценить перспективность новых ингибиторов МБЛ грамотрицательных микроорганизмов. Выявлен дозозависимый эффект повышения уровня МПК меропенема от количества реактива МБЛ в модельной системе в отношении ранее чувствительных к антибиотику референс-штаммов микроорганизмов. Отмечена инактивация фермента МБЛ даже малыми дозами бисфосфоната, в исследованиях показана задержка появления логарифмичес кой фазы роста тест-культуры P. aeruginosa ATCC 27853 до 12 часов по сравнению с контролем. При этом максимальные дозы этидроновой кислоты 50 000–100 000 мкг/мл полностью ингибировали МБЛ, наблюдали отсутствие логарифмической фазы роста микроба за счет действия меропенема на уровне референтного значения чувствительности (2 мкг/мл). Выявлено синергидное действие (индекс ФИК

Отмечена инактивация фермента МБЛ даже малыми дозами бисфосфоната, в исследованиях показана задержка <...> Начиная с 4-го ряда, интенсивность инактивации ферментом снижалась, и в 8-м ряду отмечали отсутствие <...> Начиная с 5-го ряда, интенсивность инактивации фермента снижалась, и в 8-м ряду отмечали отсутствие роста <...> В ячейках без этидроновой кислоты отмечали рост тестштамма за счет инактивации антибиотика ферментом <...> Выявлена инактивация фермента МБЛ даже малыми дозами бисфосфоната.

20

ЛИПАЗА ЗАРОДЫШ ЕЙ СЕМЯН ПШЕНИЦЫ: ПРЕПАРАТИВНОЕ ПОЛУЧЕНИЕ, СВОЙСТВА, РЕГУЛЯЦИЯ АКТИВНОСТИ АВТОРЕФЕРАТ ДИС. ... КАНДИДАТА БИОЛОГИЧЕСКИХ НАУК

ВОРОНЕЖСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ

Целью диссертационной работы явилось получение липазы зародышей семян пшеницы в гомогенном состоянии, исследование её физико-химических характеристик, регуляции активности, а также разработка и обоснование рациональных режимов хранения и использования пшеничных зародышей в пищевой промышленности с учётом каталитических свойств липазы.

Определение активности ферментов . <...> кислотной и термической инактивации исследовали-в интервале рН 4-8,5 и температур 20-60 °С. <...> Повышение температуры до 60 °С,при­ водило к более резкой инактивации фермента : за 1 ч инкубации при <...> Исследование кинетики кислотной инактивации позволило-рас­ считать константы скорости инактивации в исследуемом <...> На рис. 3 представлены графики Аррениуса, свидетельствующие о термической инактивации липазы.

Предпросмотр: ЛИПАЗА ЗАРОДЫШ ЕЙ СЕМЯН ПШЕНИЦЫ ПРЕПАРАТИВНОЕ ПОЛУЧЕНИЕ, СВОЙСТВА, РЕГУЛЯЦИЯ АКТИВНОСТИ.pdf (0,0 Мб)

21

ЛИПОЛИТИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ МОЛОКОСВЕРТЫВАЮЩИХ ПРЕПАРАТОВ И ЕЕ РОЛЬ В ФОРМИРОВАНИИ КАЧЕСТВА СЫРА АВТОРЕФЕРАТ ДИС. ... КАНДИДАТА ТЕХНИЧЕСКИХ НАУК

ЛЕНИНГРАДСКИЙ ТЕХНОЛОГИЧЕСКИЙ ИНСТИТУТ ХОЛОДИЛЬНОЙ ПРОМЫШЛЕННОСТИ

Научная новизна работы. Впервые разработана критериальная система оценки пригодности молокосвертывающих препаратов для сыроделия по их липолитическим свойствам (А.с. № 1040702 СССР). Изучена липазная активность препаратов различного происхождения и ее зависимость от рН и температуры. Исследована кинетика инактивации свертывающей и липолитической активностей у некоторых препаратов под действием температуры и ультрафиолетового облучения. Установлена специфичность липаз молокосвертывающих препаратов. Выявлена зависимость между показателями липолиза и качеством сыров.

Исследована кинетика инактивации свертывающей и лнполитической активностей у некоторых препаратов под <...> Кинетика инактивации - по измерению остаточной активно­ сти ферментов (И. Б. Березин, Л. Л. <...> комплекса) и усиление термиче­ ской инактивации фермента при достаточно высоких температурах. <...> ­ ли инактивацию ферментов под действием УФ-облучения (табл. 4) . <...> Не выявлена заметная инактивация под действием ультрафио­ летового облучения липолитических ферментов

Предпросмотр: ЛИПОЛИТИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ МОЛОКОСВЕРТЫВАЮЩИХ ПРЕПАРАТОВ И ЕЕ РОЛЬ В ФОРМИРОВАНИИ КАЧЕСТВА СЫРА.pdf (0,0 Мб)

22

ИССЛЕДОВАНИЕ РОЛИ К0НФОРМАЦИОННОГО ФАКТОРА ПРИ ФОТОИНАКТИВАЦИИ БЕЛКОВ АВТОРЕФЕРАТ ДИС. ... КАНДИДАТА БИОЛОГИЧЕСКИХ НАУК

ИНСТИТУТ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ БОТАНИКИ АКАДЕМИИ НАУК БССР

Целью настоящей работы являлось 1) систематическое исследование связи конформационного состояния молекул белков с уровнем их фогочувствительности; 2) экспериментальная проверка возможности использования для фотоинактивации белков энергии электронного возбуждения, дезактивирующейся по безизлучательному пути.

Как правило, квантовый выход инактивации исследован­ ных белков при добавлении солей уменьшался. <...> Многие авторы отмечают повышенную устойчивость ферментов в составе фермент -субстрат­ ных комплексов по <...>инактивация на фоне протекции и активация. <...> У-б-инактивация проявляется только при довольно значительных дозах У£-света. <...> О за­ щитном действии субстрата при ультрафиолетовой инактивации не­ которых ферментов .

Предпросмотр: ИССЛЕДОВАНИЕ РОЛИ К0НФОРМАЦИОННОГО ФАКТОРА ПРИ ФОТОИНАКТИВАЦИИ БЕЛКОВ.pdf (0,0 Мб)

23

Предложен гетерогенный биокатализатор на основе инулиназы, иммобилизованной на неионогенном сорбенте Стиросорб. Проведена термическая и кислотная инактивация свободной и иммобилизованной инулиназы. Рассчитаны соответствующие значения констант инактивации. Выявлено увеличение термостабильности иммобилизованного фермента по сравнению со свободным. С помощью метода ИК спектроскопии рассмотрено влияние термоинактивации на структуру фермента

Термическую и кислотную инактивацию нативного и иммобилизованного ферментов проводили термостатированием <...> На рис.1 представлена динамика процесса инактивации свободного и иммобилизованного фермента при температурах <...>Инактивация ферментов в большинстве случаев является реакцией первого порядка и описывается уравнением <...> Для иммобилизованного фермента отмечено уменьшение константы инактивации по сравнению с нативным ферментом <...> На спектрограммах фермента при инактивации (70 °С) в течение 30 мин отмечено значительное увеличение

24

№3 [Вестник Московского университета. Серия 2. Химия, 2014]

В журнале публикуются статьи как сотрудников университета, так и авторов из других организаций России и всего мира. Тематика публикаций охватывает все отрасли химии.

На основании данных о механизме инактивации фермента были разработаны композиции из неионогенных ПАВ <...> На основании данных о механизме инактивации антистафилококкового фермента LysK разработаны подходы к <...> Т. 55. № 3 из которого видно, что инактивация фермента протекает по первому порядку с константой инактивации <...> Значения констант инактивации существенно возрастают с увеличением мольных соотношений ПЛПЭГ:фермент <...> Величина констатны инактивации фермента в присутствии полиакриловой кислоты понижается приблизительно

Предпросмотр: Вестник Московского университета. Серия 2. Химия №3 2014.pdf (2,2 Мб)

25

С помощью методов Диксона и химической модификации выявлена роль имидазольной группы гистидина, w-карбоксильных групп аспарагиновой и глутаминовой кислот, сульфгидрильных групп цистеина в гидролизе триглицеридов. Показано, что этилендиаминтетраацетат является неконкурентным ингибитором липазы

сини должно привести к инактивации фермента , что и наблюдалось в наших экспериментах. <...> Обработка липазы дитионитробензолом приводит к модификации SH-групп фермента и его инактивации . <...> При блокировании п-хлормеркурибензоатом SHгрупп наблюдалась частичная инактивация липазы. <...> Частичная инактивация фермента при блокировании сульфгидрильных групп свидетельствует об их вкладе в <...> Роль функциональных групп белка в ферментах // Ферменты . М.: Наука. 1964. С. 101–118.

26

Изученатермическаяинактивация глюкоамилазыс использованиемспектрофотометрического метода, цифровой методикидифференциально-термическогоанализа (ДТА) и др. Показана термоустойчивостьданного фермента в широком диапазоне температур. Подтверждено наличие четвертичной структуры глюкоамилазы, представленнойдвумя субъединицами

ИССЛЕДОВАНИЕ ПРОЦЕССА ТЕРМИЧЕСКОЙ ИНАКТИВАЦИИ ГЛЮКОАМИЛАЗЫ ВЕСТНИК ВГУ. <...> Серия химия, биология, фармация 2003. № 1. с. 57 – 60 УДК 577.154.31 ИССЛЕДОВАНИЕ ПРОЦЕССА ТЕРМИЧЕСКОЙ ИНАКТИВАЦИИ <...> Нами была исследована термическая инактивация глюкоамилазы при температурах 50, 60, 70 0С. <...> Скорость инактивации фермента в растворе быстро возрастает с повышением температуры от 500 С до 700 С <...> Полученные данные указывают на то, что термическая инактивация глюкоамилазы представляет собой типичную

27

ВЛИЯНИЕ ЗАМЕНЫ ОСТАТКОВ Met НА ОСТАТОК Leu НА КАТАЛИТИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА, ОКИСЛИТЕЛЬНУЮ И ТЕМПЕРАТУРНУЮ СТАБИЛЬНОСТЬ ОКСИДАЗЫ D-АМИНОКИСЛОТ ДРОЖЖЕЙ [Электронный ресурс] / Атрошенко [и др.] // Вестник Московского университета. Серия 2. Химия.- 2016 .- №4 .- С. 47-57 .- Режим доступа: https://сайт/efd/373180

Окислительная стабильность ферментов определяется в первую очередь остатками Cys и Met. В случае оксидазы D-аминокислот (DAAO, КФ 1.4.3.3) из дрожжей Trigonopsis variabilis (TvDAAO) методом направленного мутагенеза получены три мутеина с точечными заменами остатка Met на остаток Leu. Выбор положений для введения замены сделан на основе множественного выравнивания аминокислотных последовательностей DAAO из разных источников, а также анализа трехмерной структуры TvDAAO. Для полученных мутантов изучены каталитические свойства, а также температурная и окислительная стабильность. Во всех случаях замена привела к изменению у мутантных ферментов профиля субстратной специфичности. Наблюдается заметное увеличение констант Михаэлиса для небольших субстратов и уменьшению КМ для D-аминокислот с объемным боковым радикалом. Показано, что в результате одной из замен происходит повышение температурной стабильности TvDAAO в 2–3 раза по сравнению с ферментом дикого типа. Разработана методика определения стабильности TvDAAO к действию пероксида водорода. Изучена окислительная стабильность фермента дикого типа и полученных мутантных TvDAAO. Установлено, что во всех случаях замена остатка Met на остаток Leu незначительно повлияла на окислительную стабильность фермента.

Инактивацию мутантных TvDAAO и фермента дикого типа в присутствии пероксида водорода изучали в 0,05 М <...> двух экспоненциальных функций, а скорость инактивации фермента зависит от его концентрации

Единственный в России и странах СНГ научно-технический и информационно-аналитический ежемесячный журнал о научно-технических разработках по всем направлениям холодильной, криогенной техники и технологии, по кондиционированию и вентиляции, автоматизации и управлению, рефтранспорту, процессам и аппаратам пищевых производств, рабочим веществам, проблемам экологии и энергосбережения. Более 100 лет журнал является первоисточником информации по фундаментальным и прикладным работам ведущих отечественных и зарубежных ученых, а также изданием для публикации результатов диссертаций на соискание ученой степени кандидата и доктора наук. Журнал входит в международную реферативную базу данных Agris, зарегистрирован в Российском индексе научного цитирования (РИНЦ).

Ключевые слова: СВЧ-обработка, инактивация пероксидазы и оксидазы, свеженарезанный картофель, режимы <...> При этом целесообразно устанавливать оптимальное время обработки СВЧ-полем, чтобы процесс инактивации <...>ферментов не приводил к чрезмерному размягчению ткани продукта. <...>Инактивация пероксидазы на поверхности и внутри кусочков произошла только через 3 мин (рис. 3, Г), при <...> Таким образом, по результатам исследований инактивации ферментов и микроорганизмов оптимальным режимом

Предпросмотр: Холодильная техника №8 2019.pdf (0,5 Мб)

32

"ПРОБЛЕМА ""УЗНАВАНИЯ"": АМИНОАЦИЛ-ТРНК-СИНТЕТАЗЫ И ИХ ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ С ТРНК" АВТОРЕФЕРАТ ДИС. ... ДОКТОРА БИОЛОГИЧЕСКИХ НАУК

М.: ОРДЕНА ЛЕНИНА ИНСТИТУТ БИОХИМИИ ИМЕНИ А. Н. БАХА АКАДЕМИИ НАУК СССР

ОСНОВНЫЕ выводы 1 . Исходным пунктом экспериментального изучения проблемы узнавания является развитие методических основ исследования аминоацил-тРНК-синтетаз и тРНК.

" .Таблица Влияние,субстратов на скорость териоифото,; инактивации АРСаз из печени крыс, Термоинактивация <...> Однако при совместном.их присутствии в условиях, когда образуется ва.... лиладѳнилаг, "инактивация фермента <...> Усиление«инактивации , наблюдаемое в присутствии " ! <...> Влияние тРНК на фотохимическую ияакхивацив АРСаэ fиз печени крыс. инактивация в отсутствие тРНК <...> : в зависимости от при­ роды субстрата и АРСазы наблюдалось усиление инактивации , защитный аффект или

Предпросмотр: ПРОБЛЕМА УЗНАВАНИЯ АМИНОАЦИЛ-ТРНК-СИНТЕТАЗЫ И ИХ ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ С ТРНК.pdf (0,0 Мб)

33

Общие положения Экзокринная недостаточность поджелудочной железы (ПЖ) часто встречается в практической деятельности врача, как терапевта, так и педиатра Классификация По происхождению: первичная (врожденная), вторичная (приобретенная). По механизму: абсолютная и относительная. Первичная (врожденная) экзокринная панкреатическая недостаточность (ЭПН) формируется во внутриутробном периоде и обусловлена нарушениями эмбриогенеза или/и генетическими дефектами. Вторичная (приобретенная) ЭПН связана с заболеваниями, развивающимися в постнатальном периоде.

34

БИОСИНТЕЗ И СВОЙСТВА ГЛЮКОАМИЛАЗЫ ASPERGILUFS AWAMORI АВТОРЕФЕРАТ ДИС. ... КАНДИДАТА БИОЛОГИЧЕСКИХ НАУК

М.: ОРДЕНА ЛЕНИНА ИНСТИТУТ БИОХИМИИ ИМЕНИ А. Н. БАХА АКАДЕМИИ НАУК СССР

ВЫВОДЫ 1. Из большого количества штаммов исследованных грибов высокой способностью к образованию глюкоамилазы обладает гриб ASPERGILUFS AWAMORI, с которым проведена данная работа. Определена активность амилолитических ферментов в глубинной культуре fisp. awnon разного возраста. При этом установлено, что на среде с азотнокислым натрием образование глюкоамилазы достигает максимума в 5-ти суточной культуре при культивировании гриба в лабораторных условиях, в колбах на качалке и в 3-х суточной культуре - при культивировании в ферментерах.

Инактивация «с -амилазы и глгакозилтрансферазы Для выделения высокоочищенного препарата глюкоамилазы <...> Используя устойчивость глюкоамилазы #sp. awna-t в кислой среде и полную инактивацию * -амилазы при <...> Для полной инактивация гликозилтрансферазы требовалось Солее длительное выдераивание не менее 24 часов <...> Разработан способ инактивации глюкозилтрансферазы и «с -амилазы в культуральном фильтрате Aspergillus <...> Трансгликозилаза, образующаяся в глубинной культуое гриба №р.аь/олюп и методы ее инактивации .

Предпросмотр: БИОСИНТЕЗ И СВОЙСТВА ГЛЮКОАМИЛАЗЫ ASPERGILUFS AWAMORI.pdf (0,0 Мб)

35

ПРОТЕИНАЗЫ ПОДЖЕЛУДОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ И ИХ ИНГИБИТОРЫ (ИЗУЧЕНИЕ ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ ПРОТЕИНАЗ С ИНГИБИТОРАМИ КРОВИ. БИОХИМИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ МЕХАНИЗМА ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНОГО ДЕЙСТВИЯ. ПРИМЕНЕНИЕ В КЛИНИКЕ) АВТОРЕФЕРАТ ДИС. ... ДОКТОРА БИОЛОГИЧЕСКИХ НАУК

АКАДЕМИЯ НАУК УКРАИНСКОЙ ССР

1. Основываясь на классической схеме выделения протеиназ, разработать метод получения медицинских препаратов кристаллического трипсина и химотрипсина для внутримышечных инъекций и дать им физико-химическую и фармакологическую оценку. 2. В эксперименте на животных изучить противовоспалительное, в частности противоотечное, действие трипсина ихнмотрнисина при парентеральном введении их, а также вопросы, имеющие отношение к выяснению некоторых сторон механизма этого действия.

Установлено, что инактивация трипсина сывороткой происходит быстро и полностью осуществляется обычно <...> Как оказалось, трипсин предохраняется от спонтанной инактивации сы­ вороточным ингибитором. <...> Это нельзя отнести за счет спонтанной инактивации фер­ мента; вероятно, он задерживается, тканями. <...> Ингибитор II вызывает общую инактивацию фермента . <...> преимущественно с ингибитором II, который количественно преобладает над ингибито­ ром I и вызывает общую инактивацию

Предпросмотр: ПРОТЕИНАЗЫ ПОДЖЕЛУДОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ И ИХ ИНГИБИТОРЫ (ИЗУЧЕНИЕ ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ ПРОТЕИНАЗ С ИНГИБИТОРАМИ КРОВИ. БИОХИМИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ МЕХАНИЗМА ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНОГО ДЕЙСТВИЯ. ПРИМЕНЕНИЕ В КЛИНИКЕ).pdf (0,0 Мб)

36

СВОЙСТВА АМИНОАЦИИ-РНК-СИНТЕТАЗ, ПРИСУТСТВУЮЩИХ ВО ФРАКЦИЙ РН5-ФЕРМЕНТОВ Е. COLI В. АВТОРЕФЕРАТ ДИС. ... КАНДИДАТА БИОЛОГИЧЕСКИХ НАУК

М.: ИНСТИТУТ БИОЛОГИЧЕСКОЙ И МЕДИЦИНСКОЙ ХИМИИ АМН СССР

СВОЙСТВА АМИНОАЦИН-РНК-СИНТЕТАЗ, ПРИСУТСТВУЮЩИХ ВО ФРАКЦИЙ РН5-ФЕРМЕНТОВ Е. COLI В.

Оказалось, что время, необходимое для тепловой инактивации исследуемых активирующих ферментов на 50£, <...> Время тепловой инактивации на 50£ тирозил-РНК-синтетазы сос­ тавляло 30 секунд. <...> о том, что падение актива ности в кислой (по отношение х оптимуму рН) областв вызва­ но необратимой инактивацией <...> различная устойчивость аминеацил-ГНК-синтетаз при инкубации ферментного препарата при ъо°. 1"епловая инактивация <...> падение активности при сдвиге рН в кислую,по отнопенив к оптимуму рН, область визвано необра­ тимой инактивацией

Предпросмотр: СВОЙСТВА АМИНОАЦИИ-РНК-СИНТЕТАЗ, ПРИСУТСТВУЮЩИХ ВО ФРАКЦИЙ РН5-ФЕРМЕНТОВ Е. COLI В..pdf (0,0 Мб)

37

ИЗУЧЕНИЕ ЗАВИСИМОСТИ МЕЖДУ ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИМИ ИЗМЕНЕНИЯМИ НАТИВНЫХ ФЕРМЕНТНЫХ БЕЛКОВ И ИХ КАТАЛИТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТЬЮ АВТОРЕФЕРАТ ДИС. ... КАНДИДАТА БИОЛОГИЧЕСКИХ НАУК

ИНСТИТУТ БИОХИМИИ АН УССР

Выводы 1. Присутствие в инкубационной смеси мочевины в концентрации до 0,166 М не влияет на активность альдолазы. Повышение ее содержания вызывает понижение активности фермента, которая находится в прямой зависимости от концентрации мочевины. 2. Активность альдолазы, выдержанной в 0,5 М растворе мочевины в течение одного часа, повышается на 14,2%...

Возникает вопрос: имеет ли здесь место частичная необрати­ мая инактивация ферментов или происходит лишь <...> мочевины до 1 М концентрации мы считаем, что в водном растворе происходит не денатурация фер­ мента, а инактивация <...> Можно полагать, что это объединение молекул в комплексы предохраня­ ет фермент от необратимой инактивации <...> образованию агрегатов, происходит не­ обратимая инактивация глицерофосфатдегидрогеназы, что связано <...>фермента ­ тивным и физико-химическим свойствам.

Предпросмотр: ИЗУЧЕНИЕ ЗАВИСИМОСТИ МЕЖДУ ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИМИ ИЗМЕНЕНИЯМИ НАТИВНЫХ ФЕРМЕНТНЫХ БЕЛКОВ И ИХ КАТАЛИТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТЬЮ.pdf (0,0 Мб)

38

Основы химии и технологии получения и переработки жиров. Ч.1. Технология получения растительных масел Учебно-методическое пособие

Ивановский государственный химико-технологический университет

В учебном пособии описаны подготовительные операции по хранению и переработке масличного сырья, технологические операции по подготовке семян к извлечению масла, изложены теоретические и технологические основы получения растительных масел методом прессования и методом экстракции, рассмотрены вопросы первичной очистки извлеченного масла. Предназначено для студентов специальности 260401 Технология жиров, эфирных масел и парфюмерно-косметических продуктов.

Условия должны обеспечить наименьшую денатурацию белков и инактивацию ферментов , детоксикацию жмыхов <...> Она содержит весь набор ферментов , характерный для живого семени. <...> При этом происходит инактивация ферментов группы фосфолипаз и фермента липаза. <...> Для обезвреживания нежелательных веществ и инактивации ферментов , которые катализируют процессы образования <...> Более сложно достичь инактивации ферментов и других нежелательных веществ, содержащихся в семенах сои

Предпросмотр: Основы химии и технологии получения и переработки жиров. Ч.1. Технология получения растительных масел.pdf (0,4 Мб)

39

БИОХИМИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ ПРОДУКТОВ АВТОЛИЗА ВИННЫХ ДРОЖЖЕЙ АВТОРЕФЕРАТ ДИС. ... КАНДИДАТА БИОЛОГИЧЕСКИХ НАУК

М.: ОРДЕНА ЛЕНИНА ИНСТИТУТ БИОХИМИИ ИМЕНИ А. Н. БАХА АКАДЕМИИ НАУК СССР

Цель и задачи исследований. - исследовать изменение активности ферментов в дрожжах и в вине при автолизе; - исследовать продукты автолиза азотистые вещества,

Последующая выдержка приводит к небольшой инактивации фермента . <...> Эти ферменты в основном выделяются в вино. <...> В про­ цессе тепловой обработки наряду с выделением "происходит инактивация ферментов . <...> процессами во. икхаюг явления термического распада химиче­ ских веществ, тепловой денатурации белков, инактивации <...> При тепловой обработке наряду с переходом веществ из дрож­ жей в вино наблюдается инактивация ферментов

Предпросмотр: БИОХИМИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ ПРОДУКТОВ АВТОЛИЗА ВИННЫХ ДРОЖЖЕЙ.pdf (0,0 Мб)

40

Работа посвящена изучению АТФ-реагента, который содержит мутантную термостабильную люциферазу светляков Luciola mingrelica, люциферин, MgS0_4, компоненты буферного раствора и стабилизаторы и широко используется для определения нано- и пикомолярных концентраций аденозин-5"-фосфата (АТФ) в различных биологических образцах. Проведена оценка активности, стабильности и аналитических характеристик АТФ-реагента в растворе в присутствии и в отсутствие 5%-й желатины и в желатиновом геле. При концентрации желатины 5% и температуре > = 30° получен раствор АТФ-реагента, а ниже 30° происходит гелеобразование. Растворы АТФ-реагента изучены при 30°, а тонкие желатиновые пленки с АТФ-реагентом - при 22°. Добавки желатины несколько снижают активность и стабильность люциферазы. Чувствительность определения АТФ (выше 0, 96) не зависела от присутствия желатины и агрегатного состояния дисперсной системы. Пределы обнаружения составляли 2 *10{-12}, 7*10{-13}, 7*10{-14} М АТФ при использовании АТФ-реагента в желатиновых пленках и в растворе в присутствии 5%-й желатины и в ее отсутствие соответственно. Показано, что хранение АТФ-реагента при 22° в желатиновом геле не только сохраняет ферментативную активность, но и защищает фермент от бактериального загрязнения, следствием чего является потеря активности люциферазы.

За это время инактивация АТФ-реагента в буфере составила всего 8%. <...> Кинетические кривые инактивации показывают (рис. 2), что во всех случаях процесс протекает по первому <...> Далее инактивация протекает по первому порядку. <...>Инактивация фермента при 4° протекала по первому порядку и не зависела от того, находится фермент в буферном <...> Березин И.В., Клячко Н.Л., Левашов А.В. и др. // Иммобилизованные ферменты . М., 1987.

41

№1 [Пищевая и перерабатывающая промышленность. Реферативный журнал, 2002]

В 1999 г. вышел первый номер реферативного журнала «Пищевая и перерабатывающая промышленность». С 2000 года издается ЦНСХБ ежеквартально. Журнал является органом текущей информации об отечественной и зарубежной литературе по пищевой промышленности. Издание предназначено для научных работников, специалистов и практиков пищевой промышленности и может служить справочным пособием для библиотекарей и работников органов научно-технической информации. Годовой объем РЖ - около 1200 публикаций. В издание включается информация о наиболее значимых статьях из научных и научно-практических журналов и сборников, поступающих в фонд ЦНСХБ и отражающих мировой документальный поток по всем отраслям пищевой промышленности.

С, фермент стабилен между 4 и 30° С, затем стабильность падала, а после 60° С происходила быстрая инактивация <...> к неполной инактивации ПФО. <...> Отмечено, что 1 и 2 не вызывают инактивации ферментов , 3 минимально, а 4а и 4б избирательно инактивируют <...> быстрая инактивация ПФО. <...> Отмечено, что 1 и 2 не вызывают инактивации ферментов , 3 минимально, а 4а и 4б избирательно

42

Биотехнологические основы применения препаратов микробиологического синтеза для обработки мясного сырья с пониженными функционально-технологическими свойствами монография

В работе Обобщены результаты многолетних исследований и систематизированы сведения, характеризующие перспективу и потенциальные возможности применения комплексных протеолитических ферментных препаратов для коррекции свойств низкосортного мясного сырья, а также для мяса имеющего отклонения в характере течения автолитических превращений. Монография подготовлена на кафедре технологии пищевых производств Казанского государственного технологического университета.

к субстрату, а по другую - результатом инактивации фермента . <...> в пищевой промышленности возможно только при условии полной его инактивации в готовом продукте, т. к <...> Как видно из полученных результатов (рис. 2.4), инактивация фермента начинается при рН 8,0 и интенсивно <...> Дальнейшее увеличение температуры инкубации до 600С приводило к полной

Целью настоящего исследования являлось изучение влияния растительного материала, внесенного в серую лесную почву, и условий ее увлажнения на активность окислительно-восстановительных ферментов.

почвы Стерилизация образцов почвы с внесенным органическим материалом \-излучением приводила к полной инактивации <...> в образцах почвы и к полной инактивации препарата фермента в кварцевом песке. <...> В кварцевом песке происходила значитель­ ная инактивация фермента . <...> Стерилизация почвы у-излучением и высокой темпера­ турой приводит к полной инактивации дсгидрогеназ, <...> Показано, что инактивация препаратов ферментов ката­ лазы и пероксидазы, внесенных в серую лесную почву

Таким образом, цель бланширования – это инактивация нежелательных ферментов , присутствующих в овощах, <...> Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис» 61№ 10/2015 между температурой и временем для инактивации <...> его формы, размеров, структуры, степени зрелости и особенно от вида ферментных систем, подвергаемых инактивации <...> при низких температурах иногда используется с целью улучшения текстуры продукта за счет избирательной инактивации <...> Пероксидаза является одним из самых термостабильных ферментов .

45

АРГИНАЗА СЕМЯН ВИКИ МОХНАТОЙ АВТОРЕФЕРАТ ДИС. ... КАНДИДАТА БИОЛОГИЧЕСКИХ НАУК

М.: МОСКОВСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ ПЕДАГОГИЧЕСКИЙ ИНСТИТУТ ИМЕНИ В. И. ЛЕНИНА

Выводы 1. Гидролиз аргинина в присутствии препаратов аргиназы из семян вики только в начальные сроки инкубации подчиняется условиям мономолекулярного процесса. При дальнейшем ходе реакции наблюдается отставание эмпирических скоростей от рассчитанных для условии реакции первого порядка.

для расчета констант ингпбировання фермента продуктом реакции (орннтином). <...> субстратом и иигпбиропание продуктами реакции; 2) тепловая инактивация фермента в процессе реакции. <...> Вся совокупность точек определяет одну кривую, и поэтому можно полагать, что тепловой инактивации фермен <...> Так как показа­ но, что не происходит тепловой инактивации препаратов во время реакции, то следует предположить <...>Инактивация растительной аргиназы в процессе ферментативного гидролиза аргинина.

Предпросмотр: АРГИНАЗА СЕМЯН ВИКИ МОХНАТОЙ.pdf (0,0 Мб)

46

Свободные радикалы, к которым относятся активированные кислородные метаболиты и оксид азота, при избыточном образовании могут играть значимую роль в возникновении патологических состояний репродуктивной системы: эндометриоза, диффузной мастопатии, индукции канцерогенеза различной локализации. Имеются данные, подтверждающие роль окислительного стресса в женской инфертильности. Результаты доклинических и клинических исследований подтверждают целесообразность применения антиоксидантов для профилактики и лечения этих заболеваний. Витамины А, С, Е вследствие своей доступности, распространенности в природе, лучшей изученности и сродства к организму человека наиболее часто включаются в состав комплексной терапии. Имеется значительная доказательная база эффективности применения витаминов-антиоксидантов для лечения заболеваний репродуктивной системы. Более высокая эффективность комплексной фармакотерапии с применением антиоксидантов объясняется не только влиянием на перекисное окисление липидов как на одно из звеньев патогенеза заболевания, но и изменением интенсивности метаболизма назначаемых одновременно с антиоксидантами лекарственных препаратов за счет восстановления цитохрома Р450 3А4. Электрохимический анализ каталитической активности цитохрома Р450 3А4 показал, что витамины А, С и Е влияют на восстановление цитохрома Р450 3А4 за счет антиоксидантного действия.

Эти процессы идут под контролем ферментов , исключающих утечку реакционноактивных продуктов. <...> за собой нарушение ее регуляторных функций в отношении важнейших процессов клеточного метаболизма: в инактивации <...> АФК могут взаимодействовать с цитохромом Р450, вызывая инактивацию фермента . <...> Витамины С, Е и бета-каротин обеспечивают неферментативную АОЗ организма за счет инактивации на разных <...> Бета-каротин, наряду с инактивацией на разных уровнях активных форм кислорода, способен восстанавливать

47

РЕГУЛЯЦИЯ И СВОЙСТВА ВИТРОГЕНАЗНОЙ СИСТЕМЫ RODOBACTER CAPSULATUS АВТОРЕФЕРАТ ДИС. ... КАНДИДАТА БИОЛОГИЧЕСКИХ НАУК

М.: ИНСТИТУТ МИКРОБИОЛОГИИ АКАДЕМИИ НАУК СССР

Целью данной работы было изучение свойств в регуляции нитрогеказной системы пурпурной несерной бактерии Rhodobaoter сapaulatua штамм BIO

Следовательноi переход нитрогевазы этой бактерии в НГр-форыу на является инактивацией фермента как таковоч <...> Существенную роль а инактивации нитрогеназы;и Фд I R.capaula«инактивацией этого фермента /поскольку он сохраняет активность. in vivo и inviSiw при использования <...> Нитратредуктаза B.capeulatua является ферментом диосимиляторного типа. 8. <...> Значи­ тельную роль в инактивации нщрогеназы, и ферредоксина I моле: кулярным кислородом играют продукты

Предпросмотр: РЕГУЛЯЦИЯ И СВОЙСТВА ВИТРОГЕНАЗНОЙ СИСТЕМЫ RODOBACTER CAPSULATUS.pdf (0,0 Мб)

48

Содержание свободного гепарина в плазме крови пациентов с истинной полицитемией и частота неврологических общемозговых симптомов [Электронный ресурс] / Гайдукова, Ткаченко, Бублий // Гематология. Трансфузиология. Восточная Европа.- 2016 .- №1 .- С. 47-57 .- Режим доступа: https://сайт/efd/478925

Актуальность. Истинная полицитемия (ИП) – заболевание из группы миелопролиферативных неоплазий, для клинических проявлений которого свойственны склонность к кровоточивости и тромбообразованию Цель: изучить содержание свободного гепарина в плазме крови пациентов с ИП и определить структуру общемозговых симптомов при этом заболевании. Материалы и методы. Обследовано 32 пациента с ИП. Среди обследованных пациентов 18 мужчин и 14 женщин. Средний возраст обследованных пациентов составил 57,2±1,2 года. Вторую группу наблюдения составили 52 пациента, обследованные в связи с подозрением на миелопролиферативные заболевания крови, но после тщательного клинико-гематологического обследования такие заболевания у них были исключены, а состояние периферической крови было расценено как абсолютный СЭ, обусловленный наличием тех или иных соматических заболеваний. Среди обследованных пациентов было 30 мужчин и 22 женщины. Средний возраст пациентов 2-й группы составил 55,7±3,6 года. Контрольную группу составили 35 практически здоровых лиц аналогичного возраста. Количественное определение содержания свободной фракции гепарина проводили методом электрофоретического анализа по методике Б.В. Михайличенко, С.В. Выдыборца (2000). Результаты и выводы. У пациентов ИП наблюдается разбалансирование обмена свободного гепарина, что проявляется увеличением его содержания в плазме крови. В обсуждении изложены данные о физиологической роли гепарина. Показано, что его действие заключается не только в регуляции гемостаза, но и в контроле ангиогенеза, иммунных реакциях, регуляции жирового и углеводного обмена, антибактериальной, антивирусной и противовоспалительной активности. Обсуждаются возможные механизмы возникновения выявленных нарушений.

В первую очередь в работе рассматриваются следующие вопросы: 1. Изменяются ли свойства РНК-полимеразы при соединении ее с ДНК еще до начала синтеза РНК. 2. С чем связана стабилизация полимеразы в присутствии ДНК и НТФ: с актом инициации, т.е. соединением первых НТФ, с процессом синтеза длинных цепей полинуклеотидов или со стабилизирующим действием НТФ на РНК-полимеразу, не связанным с соединением нуклеотидов между собой. 3. Имеет ли значение для стабилизации полимеразы при синтезе РНК сохранение размеров и двуспиральной нативной структуры матричной ДНК.

Условия инкубации г I свободный фермент ; 2 фермент + ДНК} 3 фермент + ДНК + НТФ. <...> Таблица 7 Инактивация РНК-полимеразы трипсиноы в зависимости от условий ее преинкубации Во время преинкубации <...> Результат этот, также как данные по инактивации

В работе изучен эффект действия высокой повреждающей температуры (45оС) в течение двух и двенадцати часов на растения G. max и G. soja по изменению электрофоретических спектров пероксидазы и каталазы. Количественные и качественные изменения электрофоретических спектров листьев, вызванные действием теплового стресса зависели от генотипа, фазы развития сои и продолжительности стрессового фактора. Показано, что кратковременный температурный стресс не приводит к количественным изменениям электрофоретических спектров пероксидазы и каталазы в листьях сои. Длительное воздействие высокой повреждающей температуры вызывает инактивацию в основном форм пероксидазы и каталазы со средней электрофоретической подвижностью. Стабильные формы пероксидазы с Rf 0,02; 0,10; 0,21 (G. max) и Rf 0,02; 0,10; 0,40 (G. soja), каталазы с Rf 0…0,04 (G. max) и Rf 0…0,04; 0,22…0,24 (G. soja), а также активизирующиеся при высоких температурах малоподвижные формы обеспечивают функционирование растений в условиях стресса

Длительное воздействие высокой повреждающей температуры вызывает инактивацию в основном форм пероксидазы <...> Длительное воздействие теплового шока приводит к инактивации ферментов . <...> В механизмах термоадаптации сои немаловажную роль играют множественные молекулярные фор мы ферментов <...> Воздействие высокой повреждающей температуры в течение двенадцати часов вызывает инактивацию в основном <...> Роль ферментов в устойчивости рас тений/К.Н.Сарсенбаев, Ф.А.Полимбетова//АН КазССР, Главный бот. сад.

Haugaard в 1946 г. показал, что ферменты, активность которых зависит от присутствия восстановленных форм сульфгидрильных групп, необычно чувствительны к токсическому действию кислорода. В 1972 г. Tjioe, Haugaard пришли к выводу о связи инактивации таких ферментов при действии О2 под абсолютным давлением 5 кгс/см2 с исчезновением активных сульфгидрильных групп.

В легких у крыс под воздействием гипероксии (PiО2=5 кгс/см2) активность гидрогеназы и содержание сульфгидрильных групп были значительно снижены после 15-30 мин экспозиции, и при этом в тканях отмечали не макроскопические, а только небольшие микроскопические изменения. После 45 мин экспозиции наблюдали поражение легких и увеличение содержания бисульфидов.

Кроме ферментов , содержащих активные сульфгидрильные группы, под влиянием гипероксии, как известно, инактивируются многие другие ферменты. Возможно также, что потенциально активные радикалы могут вызывать необратимые поражения пептидных цепей и особенно аминокислот .

Пероксидация лнпидов

Взаимодействие ненасыщенных липидов с переокисленным анионом или с некоторыми другими свободными радикалами может вначале привести к высвобождению липидного радикала, а затем в результате самоокисления в присутствии кислорода образовать липидный пероксидный радикал . Дальнейшее взаимодействие перекиси липидов с другими липидами способно циклически регенерировать липидные свободные радикалы и перекисные соединения, вызывая тем самым цепную реакцию и прогрессирующее переокисление липидов.

Kovachich, Mishra (1980) показали, что переокисление липидов в срезах мозга крыс появляется даже во время экспозиции в условиях нормального давления воздуха с накоплением перекисных соединений в среде, так же как во внутриклеточной жидкости. Хотя вызванное действием кислорода переокисление липидов еще не продемонстрировано с определенной ясностью in vivo, в литературе имеются сообщения, что оно может иметь место в ткани мозга, эритроцитах, пузыре лягушки и в изолированном легком крысы.

В литературе имеется множество сообщений о том, что связанные с мембраной активные транспортные системы имеют тенденцию к инактивации под влиянием кислорода. Точно установлено, что потребление солей глутаминовой кислоты зависит от транспортной системы, связанной с переносом калия . В 1957 г. Kaplan, Stein на срезах коры головного мозга морских свинок, подвергнутых воздействию кислорода под абсолютным давлением 6 кгс/см2 в течение 90 мин, обнаружили как нарушение процессов потребления тканями солей глутаминовой кислоты, так и накопления калия.

Аналогичные закономерности были установлены в 1970 г. Joanny и сотрудниками на кортикальных срезах мозга, подвергнутых воздействию кислорода под абсолютным давлением в диапазоне 1-10 кгс/см2. Из литературных сообщений известно также о повреждениях активного транспорта натрия в препарате пузыря жабы и в изолированном лоскуте кожи лягушки под влиянием гипероксии. В 1973 г. Allen и сотрудники пришли к выводу, что наиболее вероятный механизм инактивации транспорта натрия под влиянием кислорода состоит в образовании промежуточных продуктов перекисей липидов.

На нарушение натриевого насоса мембраны клеток в кортикальных срезах, взятых у крыс, подвергнутых гипероксии под абсолютным давлением 4 кгс/см2, указывает наблюдаемое явление инактивации Na-K-АТФазы.

Усвоение как серотонива , так я вор-адреналина в изолированно перфузируемом препарате легких, взятом у крыс, подвергнутых действию кислорода под абсолютным давлением 1 кгс/см2, снижается . Оба этих изменения были значительными в пределах 12-24-часовой экспозиции, т. е. задолго до наступления структурных повреждений или появления клинических симптомов кислородного отравления легких.

Наоборот, клиренс имипрамина не изменялся в изолированных легких у крыс, которые дышали чистым кислородом при нормальном атмосферном давлении в течение около 48 ч . Полученные результаты согласуются с возможностью активного транспорта серотонина и норадреналина в эндотелиальных клетках легочных капилляров, в то время как удаление имипрамина происходит путем пассивного связывания . Кроме того, цитируемые авторы обнаружили, что токсическое влияние кислорода на мембрану эндотелиальных клеток распространяется либо не на один переносчик, либо на некоторые основные компоненты, вовлеченные в транспорт обоих аминов.

Местная гипотермия (лед на живот)

Использование блокаторов протонной помпы

9.Характерные нарушения секреции pancreas при хроническом панкреатите:

Повышение активности амилазы

Повышение активности липазы

Экскреторная ферментная недостаточность

Гиперинсулинизм

Повышение активности трипсина

10.Клиническая картина панкреонекроза не характеризуется:

Опоясывающими болями в животе

Многократной рвотой

Пневмоперитонеумом

Коллапсом

Парезом кишечника

ВАРИАНТ 2

1.Наиболее информативный метод инструментальной диагностики при подозрении на острый панкреатит:

Целиакография

Лапароцентез

ЭРПХГ

ФГДС

2.Основными осложнениями острого деструктивного панкреатита являются (один ответ лишний):

Болевой шок

Перфорация желчного пузыря

Перитонит

Забрюшинная флегмона

Аррозивные кровотечения

3.В патогенезе острого панкреатита главенствующая роль принадлежит:

Агрессивному воздействию соляной кислоты на паренхиму железы

Развитию инфекции в паренхиме железы

Активации ферментов в железе и ее аутолизу

Развитию склерозирующего процесса в паренхиме железы

Агрессивному воздействию пепсина на паренхиму железы

4.Ослабление пульсации брюшной аорты при остром панкреатите носит название симптома:

Мейо-Робсона

Ортнера

Мерфи

Мондора

Воскресенского

5.Признаки инкреторной недостаточности поджелудочной железы при хроническом панкреатите:

Гипербилирубинемия

Креаторея

Гипергликемия, глюкозурия

Снижение активности

Стеаторея

6.Рак поджелудочной железы, соответствующий Т3:

Распространяется за пределы поджелудочной железы, но не вовлекает чревную или брыжеечную артерию

Распространяется на чревную или брыжеечную артерию

Преинвазивная карцинома

Опухоль ограничена поджелудочной железой до 2см

Опухоль ограничена поджелудочной железой более 2см

7.Наиболее характерными для острого панкреатита являются боли с иррадиацией:

В правое бедро

В спину

В правую лопатку

В левое надплечье

В правое надплечье

8.Наиболее информативным методом диагностики панкреонекроза является:

Эзофагогастродуоденоскопия

Лапароцентез

Лапароскопия

Обзорная рентгеноскопия брюшной полости

9.К приобретенным кистам поджелудочой железы относятся (один ответ лишний):

Ретенционные кисты

Дегенеративные

Пролиферационные цистаденомы

Пролиферационные цистаденокарциномы

Тератоидные

10.Оптимальный вариант операции при кисте pancreas:

Наружное дренирование

Внутреннее дренирование

Марсупилизация кисты

Фенестрация кисты

ВАРИАНТ 3

1.Метод, препятствующий ферментному аутолизу поджелудочной железы:

Дренирование грудного лимфатического протока

Применение цитостатиков

Плазмаферез

Гемосорбция

Перитонеальный диализ

2.Механизм лечебного действия цитостатиков при остром панкреатите:

Подавление секреции желудочного содержимого

Уменьшение воспаления в железе

Улучшение микроциркуляции в pancreas

Подавление экзокринной функции железы

Нормализация инкреторной функции железы

3.Болезненность при пальпации в левом реберно-позвоночном углу характерна для симптома:

Воскресенского

Мейо-Робсона

Курвуазье

Мондора

Мерфи

4.Препараты для лечения острого панкреатита (один ответ лишний):

1. спазмолитики (баралгин, атропин)
2. цитостатики (5-фторурацил, циклофосфан)
3. ингибиторы протеаз (контрикал, гордокс)
4. аналоги соматостатина (сандостатин, стиламин)
5. наркотики (морфин)

5.Формы острого панкреатита (один ответ лишний):

1. острый отек
2. геморрагический панкреонекроз
3. жировой панкреонекроз
4. смешанный панкреонекроз
5. киста поджелудочной железы

6.К развитию острого панкреатита может привести (один ответ лишний):

Закрытая травма поджелудочной железы

Операционная травма поджелудочной железы

Ущемленный камень БДС

Стриктура БДС

Цирроз печени

7.К методам детоксикации при остром панкреатите относятся (один ответ лишний):

Плазмоферез

Гемотрансфузия

Гемосорбция

Кишечный диализ

Интестинальная интубация

8.Оптимальный вариант операции при нагноившейся кисте pancreas:

Чрескожное наружное дренирование под контролем УЗИ

Гастроцистостомия

Панкреатодуоденальная резекция

Марсупилизация кисты

Фенестрация кисты

Скорость ферментативной реакции, иными словами, активность фермента определяется также присутствием в среде активаторов и ингибиторов: первые повышают скорость реакции и иногда модифицируют ее, вторые - тормозят реакцию. Среди химических соединений, оказывающих влияние на активность ферментов, встречаются разнообразные вещества. Так, НС1 активирует действие пепсина, желчные кислоты - панкреатической липазы; некоторые тканевые ферменты (оксидоредуктазы, катепсины, аргиназа), растительная протеиназа папаин и др. в значительной степени активируются соединениями, содержащими свободные SH-группы (глутатион, цистеин), а некоторые также витамином С. Особенно часто в качестве активаторов служат (выступают) ионы двухвалентных и иногда одновалентных металлов. Многие ферменты вообще не активны в отсутствие металлов. Так, при удалении цинка угольная ангидраза практически лишена ферментативной активности; более того при действии этого фермента цинк не может быть заменен никаким другим металлом. Известны ферменты, действие которых активируется рядом металлов, в частности, енолаза (см. Углеводный обмен) активируется Mg 2+ , Mn 2+ , К + . В табл. 18 приведены примеры участия металлов в действии некоторых ферментов.

Таблица 18. Металлы в активировании некоторых ферментов 1 (1 Обычно трудно провести границу между металлоферментами (металл связан комплексно н незаменим) и ферментами, активируемыми металлами (последние лишь ускоряют реакцию и легко диссоциируют). )
Фермент	Металл	Фермент	Металл
Цитохромы	Fe	Амилаза	Са
Каталаза	Fe	Липаза	Са
Пероксидаза	Fe	Карбоангидраза	Zn
Триптофаноксидаза	Fe	Лактатдегидрогеназа	Zn
Гомогентизиказа	Fe	Уриказа	Zn
Аскорбатоксидаза	Си	Карбоксипептидаза	Zn
Тирозиназа	Си	Пептидазы	Mg
Фенолоксидаза	Си	Фосфатазы	Mg
Ксантиноксидаза	Мо	Фосфоглюкокиназа	Mg
Нитратредуктаза	Мо	Аргиназа	Mn
Альдегидоксидаза	Мо	Фосфоглюкомутаза	Mn
Пептидазы	Со	Холинэстераза	Mn

Относительно роли металлов в активирующем действии ферментов имеющиеся данные свидетельствуют о том, что в ряде случаев ионы металлов (Со 2+ , Mg 2+ , Zn 2+ , Fe 2+) выполняют функции простетических групп ферментов. В других случаях они способствуют присоединению субстрата к активному центру и образованию фермент-субстратного комплекса. Например, ионы Mg 2+ через отрицательно заряженную фосфатную группу обеспечивают присоединение монофосфорных эфиров органических веществ к активному центру фосфатаз, катализирующих гидролиз этих соединений. В ряде случаев металл соединяется с субстратом, образуя истинный субстрат, на который действует фермент. В частности, ионы Mg 2+ активируют креатинфосфокиназу благодаря образованию истинного субстрата и магниевой соли АТФ. Наконец, имеются экспериментальные доказательства прямого участия металлов (например, ионов Са 2+ в молекуле амилазы слюны) в формировании и стабилизации активного центра и всей третичной структуры молекулы фермента. Следует отметить также нередкую роль мeталлов в качестве аллостерических модуляторов (см. рис. 59). Взаимодействуя с аллостерическим центром, подобный металл (модулятор) способствует образованию наиболее выгодной пространственной конфигурации фермента и активного фермент-субстратного комплекса.

Анионы при физиологических концентрациях обычно неэффективны или оказывают небольшое активирующее влияние на ферменты. Исключение составляют пепсин, некоторые оксидоредуктазы, активируемые анионами, а также слюнная амилаза, катализирующая гидролиз крахмала, активность которой повышается ионами хлора, и аденилатциклаза, которая активируется анионами галогенов.

Ингибиторами принято называть вещества, вызывающие частичное или полное торможение реакций, катализируемых ферментами. Поскольку ферменты являются белками, любые агенты, вызывающие денатурацию белка (нагревание, кислоты, щелочи, соли тяжелых металлов), приводят к инактивации фермента. Однако подобное инактивирование относительно неспецифично. Оно не связано с механизмом действия ферментов. Гораздо большую группу составляют так называемые специфические ингибиторы, которые оказывают свое действие на один какой-либо фермент или на группу родственных ферментов. Исследование этих ингибиторов имеет важное значение по ряду причин.

Во-первых, ингибиторы могут дать ценную информацию о природе активного центра фермента, а также его функциональных групп и химических связей, обеспечивающих образование фермент-субстратного комплекса. Известны вещества, специфически связывающие ту или иную группу в молекуле фермента, выключая ее из сферы химической реакции. В частности, йодацетат IСН 2 -СООН, его амид и этиловый эфир, парахлормеркурибензоат ClHg - С 6 Н 4 -СООН и другие реагенты сравнительно легко вступают в химическую связь с некоторыми SH-группами ферментов. Если такие группы существенны для акта катализа, то добавление подобных ингибиторов приводит к полной потере активности фермента:

R-SH + IСН 2 -СООН --> HI + R-S-СН 2 -СООН

Ряд других ферментов (холинэстераза, трипсин и химотрипсин) сильно тормозится некоторыми фосфорорганическими соединениями, в частности диизопропилфторфосфатом (ДФФ), вследствие блокирования ключевой гидроксильной группы сери-на в активном центре (см. выше).

Во-вторых, ингибиторы нашли широкое применение в энзимологии при исследовании природы множественных форм ферментов и изоферментов, отличающихся не столько по электрофоретической подвижности, сколько по различию реакций на один и тот же ингибитор.

При помощи ингибиторов, избирательно выключающих отдельные стадии многоступенчатого метаболического процесса, могут быть точно установлены последовательность химических реакций и природа участвующих ферментов. В частности, этим путем при применении йодацетата, фторида и других ингибиторов был расшифрован гликолитический путь окислительно-восстановительных превращений глюкозы до молочной кислоты в мышечной ткани (см. Обмен углеводов), насчитывающий 11 стадий с участием 11 ферментов и 10 промежуточных метаболитов.

На ингибировании ферментов основан механизм действия многих токсинов и ядов на организм. Так, известно, что при отравлениях синильной кислотой смерть наступает вследствие полного торможения дыхательных ферментов (цитохромоксидазы), в особенности клеток мозга. Токсическое влияние на организм человека и животных некоторых инсектицидов обусловлено торможением активности холинэстеразы - фермента, играющего первостепенную роль в деятельности нервной системы.

Рациональная химиотерапия - осознанное применение лекарственных препаратов в медицине, должна опираться на точное знание механизма их действия, на биосинтез ферментов или работу их в организме. Иногда метод лечения болезней человека включает применение избирательных ингибиторов. Так, ингибитор трипсина, химотрипсина и калликреина трасилол широко используется при лечении острого панкреатита. Избирательное ингибиторное действие на ферменты некоторых природных и синтетических соединений (так называемых антиметаболитов) в настоящее время служит основой для разработки эффективных методов синтеза химиотерапевтических препаратов. На этом пути открываются широкие возможности регуляции как синтеза ферментов, так и интенсивности метаболизма.

Типы ингибирования. Несмотря на то что механизм действия большинства ингибиторов не выяснен, обычно различают обратимое и необратимое ингибирование. Если молекула ингибитора вызывает стойкие изменения или модификацию функциональных групп фермента, то такой тип ингибирования называется необратимым. Чаще, однако, имеет место обратимое ингибирование, поддающееся количественному изучению на основе уравнения Михаэлиса - Ментен. Обратимое ингибирование в свою очередь разделяют на конкурентное и неконкурентное, в зависимости от того, удается или не удается преодолеть торможение ферментативной реакции путем увеличения концентрации субстрата. Во втором случае повышение концентрации субстрата не изменяет степень ингибирования фермента.

Конкурентное ингибирование может быть вызвано веществами, имеющими структуру, похожую на субстрат, но немного отличающуюся от структуры истинного субстрата. Классическим примером подобного типа ингибирования является торможение активности сукцинатдегидрогеназы малоновой кислотой. Этот фермент катализирует окисление путем дегидрирования янтарной кислоты в фумаровую в соответствии со схемой:

Если в среду добавить малоновую кислоту (ингибитор), то в силу структурного сходства ее с истинным субстратом янтарной кислотой (наличие двух таких же ионизированных карбоксильных групп) она будет реагировать с активным центром с образованием фермент-ингибиторного комплекса (см. схему), однако при этом перенос водорода от малоната не происходит. Так как структуры субстрата - янтарной кислоты и ингибитора - малоната все же несколько отличаются, они конкурируют за связывание с активным центром, и степень торможения будет определяться соотношением концентраций малоната и сукцината, а не абсолютной концентрацией ингибитора. Этот тип ингибирования иногда называют ингибированием по типу метаболического антагонизма (рис. 56).

В общей форме реакция взаимодействия ингибитора с ферментом может быть представлена следующим уравнением:

Образовавшийся комплекс, называемый фермент-ингибиторным комплексом (EI), в отличие от ES не распадается с образованием продуктов реакции. Константу диссоциации EI-комплекса или ингибиторную константу (K 1) можно, следуя теории Михаэлиса - Ментен, определить как отношение констант обратной и прямой реакций:

т. е. ингибиторная константа прямо пропорциональна произведению концентрации фермента и ингибитора и обратно пропорциональна концентрации ЕI-комплекса.

Метод конкурентного торможения нашел широкое применение в медицинской практике. Известно, например, что для лечения некоторых инфекционных заболеваний, вызываемых бактериями, применяют сульфаниламидные препараты. Оказалось, что эти препараты имеют структурное сходство с парааминобензойной кислотой, которую бактериальная клетка использует для синтеза фолиевой кислоты, являющейся составной частью ферментов бактерий. Благодаря этому структурному сходству сульфаниламид, например, блокирует действие фермента путем вытеснения парааминобензойной кислоты из комплекса с ферментом, синтезирующим фолиевую кислоту, что ведет к торможению роста бактерий.

Некоторые аналоги витамина В 6 и фолиевой кислоты, в частности дезоксипиридоксин и аминоптерин (см. Витамины), действуют как конкурентные, так называемые коферментные ингибиторы (или антивитамины), тормозящие многие биохимические процессы в организме.

Неконкурентное ингибирование вызывается веществами, не имеющими структурного сходства с субстратами и часто связывающимися не с активным центром, а в другом месте молекулы фермента. Степень торможения во многих случаях определяется продолжительностью действия ингибитора на фермент. При данном типе ингибирования благодаря образованию стабильной ковалентной связи фермент часто подвергается полной инактивации, и тогда торможение становится необратимым. Примерами неконкурентного ингибирования (инактивации) является действие йодацетата, диизопропилфторфосфата, а также диэтил-n-нитрофенилфосфата и синильной кислоты, заключающееся в связывании и выключении функциональных групп или ионов металлов в молекуле фермента.

Для выяснения вопроса о типе ингибирования пользуются уравнением Михаэлиса - Ментен, графиком Лайнуивера - Бэрка и другими более усовершенствованными уравнениями, например уравнением Эди - Хофсти:

v = - К m (0/[S]) + V mах

и соответствующими графиками в прямолинейных координатах. В приведенных ниже графиках, построенных в координатах v и [S], а также в координатах 1/v и 1/[S], V - максимальная скорость реакции, V 1 - максимальная скорость в присутствии ингибитора, К 1 - ингибиторная константа; все остальные символы были представлены выше.

Видно, что при конкурентном типе ингибирования (рис. 57) ингибитор увеличивает значение К m (на величину, равную разнице в длине отрезков, отсекаемых от оси абсцисс), не оказывая влияния на максимальную скорость. Это означает, что при достаточно высокой концентрации субстрата [S] ингибитор вытесняется молекулами субстрата из комплекса EI. При неконкурентном ингибировании (рис. 58) ингибитор снижает величину максимальной скорости. Если при этом величина К m не уменьшается, то говорят о полностью неконкурентном ингибировании. Подобный тип ингибирования имеет место при образовании неактивных, труднодиссоциирующих комплексов EI и (или) EIS. Часто, однако, имеет место смешанный тип ингибирования (иногда называемый частично неконкурентным типом), при котором снижение V mах сочетается с увеличением К m . Это означает, что комплекс EI сохраняет частичную активность, т. е. способность к образованию промежуточного тройного комплекса EIS, в котором субстрат подвергается замедленному каталитическому превращению. В редких случаях степень торможения активности фермента может увеличиваться с повышением концентрации субстрата; для этого типа торможения был предложен довольно неточный термин бесконкурентный (от англ. uncompetitive). Один из механизмов такого торможения обусловлен возможностью соединения ингибитора с комплексом ES с образованием неактивного или медленно реагирующего тройного комплекса ESI.

Таким образом, при графическом анализе скоростей ферментативных реакций как функции концентраций субстрата может быть получена ценная информация по кинетике ферментативных реакций, освещающая возможный механизм ферментативного катализа.

Регуляция активности ферментов

Выше было указано, что одним из уникальных свойств живых организмов является удивительная способность к сбалансированности катаболических (биодеградативных) и анаболических (биосинтетических) процессов. Хотя в клетках одновременно совершаются процессы синтеза, распада и взаимопревращения сотен и тысяч разнообразных веществ, имеется множество регуляторных механизмов, обеспечивающих постоянство внутренней среды организма. Некоторые из этих регуляторных механизмов, среди которых важная роль принадлежит механизмам регуляции активности ферментов, будут рассмотрены ниже.

Влияние закона действия масс. В катализируемой ферментом обратимой химической реакции, например A+B C+D, концентрация компонентов реакции и соответственно направление реакции будут регулироваться влиянием закона действия масс. Оно, в частности, может быть показано в обратимой реакции трансаминирования, катализируемой аланинаминотрансферазой:

Аланин + α-Кетоглутарат Пируват + Глутамат.

Этот тип регуляции играет, очевидно, лишь ограниченную роль, поскольку в реальных условиях реакция обычно протекает в одном направлении, так как образовавшиеся продукты могут оказаться субстратами для действия других ферментов и выводиться из сферы реакции; в этих случаях устанавливается скорее устойчивое (стационарное) состояние, чем истинное равновесие.

Изменение количества фермента. У бактерий хорошо изучен феномен индуцированного синтеза ферментов при выращивании их на среде, где единственным источником углерода и энергии служит тот или иной углевод, допустим, глюкоза. Замена глюкозы в среде на лактозу приводит к индуцированному или адаптированному (после небольшого периода лагфазы) синтезу фермента галактозидазы (программированному лактозным геном, см. Синтез белка), расщепляющей лактозу на глюкозу и галактозу. В животных тканях подобный быстрый синтез ферментов наблюдается сравнительно реже, и механизм, индуцирующий синтез, изучен только для небольшого числа ферментов (тирозинтрансаминазы, серин- и треониндегидратазы, триптофанпирролазы и др.). Однако при поступлении в организм некоторых ядов, канцерогенных веществ, алкалоидов, инсектицидов и др. наблюдается резкое увеличение через несколько дней активности (соответственно количества) ферментов - гидроксилаз гладкого эндоплазматического ретикулума клеток печени; окисляющих чужеродные вещества в нетоксичные для организма продукты. С другой стороны, описаны случаи, когда под действием подобных гидроксилаз чужеродные вещества превращаются в организме в более токсичные соединения. Это явление, обратное детоксикации, получило название летального синтеза.

Проферменты. Протеолитические ферменты желудочно-кишечного тракта и поджелудочной железы синтезируются в неактивной форме, в виде проферментов (зимогенов). Регуляция в этих случаях сводится к превращению проферментов в активные ферменты под влиянием специфических агентов. Так, трипсин синтезируется в поджелудочной железе в форме трипсиногена. Последний превращается в активный трипсин в кишечнике под действием другого белкового фермента - энтерокиназы, впервые открытого в лаборатории И. П. Павлова. Установлено, что активирующее действие энтерокиназы сводится к отщеплению от трипсиногена гексапептида, приводящему к формированию нативной третичной структуры трипсина и его активного центра (см. выше); наблюдается также аутокатализ. Превращение неактивного пепсиногена в активный пепсин осуществляется аутокаталитически в результате ограниченного протеолиза в присутствии НС1 и также связано с отщеплением от первого специфического ингибитора полипептидной природы (см. Обмен простых белков). Синтез протеиназ в неактивной форме и ряда других неактивных белков-предшественников имеет, очевидно, определенный биологический смысл, предотвращая разрушение клеток органов, в которых образуются проферменты.

Химическая модификация фермента. Выше было указано (см. Химия белков), что ряд белков при формировании третичной структуры подвергается постсинтетической модификации. Оказалось, что ключевые ферменты энергетического обмена - фосфорилаза, гликогенсинтетаза и др. - также контролируются путем фосфорилирования и дефосфорилирования, осуществляемого специфическими ферментами - протеинкиназой и протеинфосфатазой, уровень активности которых в свою очередь регулируется гормонами (см. Обмен углеводов). Уровень активности ключевых ферментов и соответственно интенсивность процессов обмена будут определяться соотношением фосфорилированных и дефосфорилированных форм этих ферментов.

Регуляция активности ферментов по принципу обратной связи. Во многих строго биосинтетических реакциях основным типом регуляции скорости многоступенчатого ферментативного процесса является ингибирование по принципу обратной связи, когда конечный продукт биосинтетической цепи подавляет активность фермента, катализирующего первую стадию.

Предположим, что в клетках осуществляется многоступенчатый биосинтетический процесс, каждая стадия которого катализируется собственным ферментом:

Скорость подобной суммарной последовательности реакций в значительной степени определяется концентрацией конечного продукта (Р), накопление которого выше допустимого уровня оказывает мощное ингибирующее действие на первую стадию процесса, соответственно на фермент E 1 .

Впервые существование подобного механизма контроля активности ферментов метаболитами было показано у Е. coli при исследовании синтеза изолейцина и цитидинтрифосфата (ЦТФ). Оказалось, что изолейцин, являющийся конечным продуктом, избирательно подавляет активность треониндегидратазы, катализирующей первое звено процесса превращения треонина в изолейцин, насчитывающего пять ферментативных реакций. Аналогично ЦТФ как конечный продукт биосинтетического пути оказывает ингибирующий эффект на первый фермент (аспартаттранскарбамоилазу), регулируя тем самым свой собственный синтез. Этот тип ингибирования получил название ингибирования по принципу обратной связи или ретроингибирования. Существование его доказано во всех живых организмах, и в настоящее время он рассматривается как один из ведущих типов регуляции активности ферментов и клеточного метаболиза в целом 1 . (1 Следует указать, что скорость реакции (как и активность ферментов) в чисто биодеградативных (катаболических) процессах регулируется промежуточными продуктами, являющимися индикаторами энергетического состояния клетки (пуриновые нуклеотиды, пирофосфат, неорганический фосфат и др.). )

С другой стороны, в амфиболических процессах (см. Введение в обмен веществ и энергии), выполняющих одновременно биосинтетические и биодеградативные функции 2 , доказано существование регуляции как по типу ретроингибирования, так и макроэргами - индикаторами энергетического состояния клетки. (2 К амфиболическйм процессам относят такие пути, как гликолиз, гликогенолиз, цикл трикарбоновых кислот, гексозомонофосфатный путь, трансаминирование аминокислот (см. Обмен веществ) ). Для амфиболических процессов уникальным типом регуляции, свойственным только им, является, кроме того, активация предшественником, когда первый метаболит в многоступенчатом пути активирует фермент, катализирующий последнюю стадию. Так, доказано активирующее влияние глюкозо-6-фосфата, являющегося предшественником гликогена, на фермент гликогенсинтетазу.

Подобные типы ингибирования конечным продуктом и активирования первым продуктом свойственны аллостерическим (регуляторным) ферментам (см. выше), когда эффектор, структурно отличаясь от субстрата, связывается в особом (аллостерическом) центре молекулы фермента, пространственно удаленном от активного центра. Поэтому принято различать аллостерический тип регуляции, включающий как аллостерическое ингибирование, так и аллостерическую активацию. Взаимопревращения активного и неактивного аллостерического фермента в упрощенной форме, а также конформационные изменения, наблюдаемые при присоединении субстрата и эффекторов, представлены на рис. 59.

Видно, что присоединение отрицательного эффектора к аллостерическому центру вызывает значительные изменения конфигурации активного центра молекулы фермента и как результат потерю сродства фермента к своему субстрату (образование неактивного комплекса).

Аллостерические взаимодействия проявляются в характере кривых зависимости начальной скорости реакции от концентрации субстрата или эффектора, в частности в S-образности кривых (отклонение от гиперболической кривой Михаэлиса - Ментен). Это означает, что связывание одной молекулы субстрата облегчает связывание второй молекулы у аллостерического центра, способствуя тем самым повышению скорости реакции. Кроме того, для регуляторных (аллостерических) ферментов характерна нелинейная зависимость скорости реакции от концентрации фермента.

Другие типы регуляции активности ферментов. Существует ряд других механизмов, контролирующих скорость метаболических процессов и активность внутриклеточных ферментов. К подобным механизмам могут быть отнесены конкуренция ферментов за общий субстрат, выключение активности одного из нзоферментов (у множественных форм ферментов), влияние концентраций кофакторов и их формы (в особенности ионов металлов) и явление компартментализации. Механизм компартментализации играет, по-видимому, важную биологическую роль, пространственно разъединяя посредством биомембран ферменты от своих субстратов (например, лизосомальные ферменты: протеиназы, фосфатазы, рибонуклеазы и другие гидролитические ферменты, от веществ, на которые они действуют в цитоплазме) или взаимно несовместимые в одно и то же время метаболические процессы. Примером последних могут быть пути синтеза жирных кислот, протекающие в основном в растворимой фракции цитоплазмы, и пути распада жирных кислот, сосредоточенные в митохондриях.

Определение активности ферментов

Определение количественного содержания ферментов в биологических объектах представляет известные трудности, поскольку, за редким исключением, ферменты в тканях присутствуют в ничтожно малых концентрациях. Поэтому о количестве ферментов судят по скорости катализируемой реакции, в определенных согласованных условиях измерения. При оптимальных условиях температуры, pH среды и полном насыщении фермента субстратом скорость пропорциональна концентрации фермента. О скорости ферментативной реакции судят или по скорости убыли субстрата, или по скорости образования продукта реакции.

Для выражения концентрации фермента Комиссией по ферментам Международного биохимического союза рекомендована стандартная единица (Е). За единицу любого фермента принимается то количество его, которое в оптимальных условиях катализирует превращение 1 мкмоль субстрата в минуту (мкмоль/мин). Предложено новое определение международной единицы фермента катал (кат, kat), соответствующее количеству фермента, способному вызывать превращение 1 моль субстрата в продукт в 1 с (1 моль/с). Отношение международной единицы (Е) к каталу можно выразить следующим образом:

или 1 Е=1 мкмоль · мин -1 = (1/60) мкмоль · с -1 = (1/60) мккат = 16,67 нкат. Таким образом, 1Е фермента соответствует 16,67 нкат.

Рекомендовано, кроме того, проведение измерения единиц фермента при 25°С, оптимуме pH и концентрации субстрата, превышающей концентрацию насыщения. В этих случаях скорость соответствует нулевому порядку реакции в отношении субстрата и будет зависеть только от концентрации фермента.

Для выражения активности фермента пользуются определением удельной и молекулярной активности. Удельную активность фермента принято выражать числом единиц ферментативной активности на 1 мг белка (или числом каталов на 1 кг активного белка). Число молекул субстрата, подвергающихся превращению одной молекулой фермента в минуту, принято называть числом оборотов, или молекулярной активностью. Так, одна молекула каталазы эритроцитов способна расщепить в 1 мин 5 · 10 6 молекул перекиси водорода 1 . (1 Для того чтобы 1 атом неорганического железа, также катализирующий распад Н 2 O 2 , расщеплял такое число молекул Н 2 O 2 , которое расщепляет каталаза в 1 с, потребовалось бы более 300 лет. Этот пример является наглядным доказательством одного из главных свойств ферментов - их высокой каталитической активности. )

Ферментативный гидролиз крахмала протекает под влиянием ферментов амилаз, которые содержатся в слюне, соке поджелудочной железы, крови, печени, мозге. Источниками амилаз в промышленности служат проросшие зерна злаков (солод) и культуры плесневых грибов.

Известны а- и -амилазы, которые несколько различаются по характеру действия. Под влиянием а-амилазы процесс гидролитического расщепления крахмала задерживается главным образом на стадии декстринов, а мальтозы образуется немного, тогда как под действием Р-амилазы расщепление идет в сторону преимущественного

образования мальтозы. Последовательно этот процесс можно представить следующим образом.

Мальтоза под действием фермента мальтазы (а-глю-козидазы) распадается на две молекулы a-D-глюкозы. Встречается также фермент глюкоамилаза, катализирующий распад крахмала до глюкозы.

Ход процесса гидролитического расщепления крахмала можно проследить с помощью реакций Троммера, Бенедикта или Ниландера (см. раздел VII), характеризующих восстанавливающие свойства углеводов.

При ферментативном гидролизе крахмала увеличивается количество свободных гликозидных гидроксилов, обусловливающих восстанавливающие свойства, и поэтому мальтоза и глюкоза способны восстанавливать окись меди до закиси, гидрат окиси висмута или окись серебра до металлов.

Реактивы: а) слюна. Свежую слюну разводят в 10 раз дистиллированной водой: б) крахмал, -ный раствор; в) раствор иода в иодистом калии (раствор Люголя): в нескольких миллилитрах воды растворяют 1 г иодистого калия, в концентрированном растворе соли растворяют 1 г иода и доливают водой до 300 мл; г) едкий натр, 5%-ный раствор; д) сернокислая медь -ный раствор.

В две пробирки наливают по -ного раствора крахмала, в одну из них добавляют 1 мл разведенной слюны (1: 10), в другую - 1 мл воды и ставят на 10 мин.

в водяную баню, нагретую до 37-38° (внимательно следят за температурой, не допуская ее повышения), или, еще лучше, в ультратермостат, после чего охлаждают пробирки под краном. Проделывают реакции Троммера и с иодом, для чего содержимое каждой пробирки делят пополам.

Инактивация ферментов высокой температурой.

Являясь белковыми веществами, ферменты весьма чувствительны к температуре, при которой протекает реакция. Температурный оптимум действия ферментов теплокровных животных составляет 37-38° С. При небольшом повышении температуры (например, 40-45° С) скорость ферментативных реакций вначале повышается, но уже при дальнейшем нагревании (выше 50° С) падает, а при 70-80° утрачивается. Кипячение влечет за собой полную потерю каталитической активности ферментов вследствие денатурации их белковой части (апоферментов). При температурах ниже нуля скорость ферментативных реакций значительно понижается, но сами ферменты не разрушаются и при осторожном оттаивании восстанавливают свою активность.

Реактивы: а) слюна, разведенная в 5 раз дистиллированной водой; б) крахмал, 1%-ный раствор; в) раствор иода в иодистом калии (см. предыдущую работу); г) реактивы для реакции Троммера (см. предыдущую работу).

В две пробирки наливают по 1 мл разведенной слюны. Содержимое одной из них нагревают до кипения и кипятят 2-3 мин. Затем в обе пробирки добавляют по 1 мл раствора крахмала и ставят на 10 мин. в водяную баню, нагретую до 38° С, после чего проделывают реакции Троммера и с иодом. Убеждаются, что в пробирке, в которой фермент был инактивирован кипячением, расщепления крахмала не произошло.

Специфичность действия ферментов.

Это одно из важнейших свойств ферментов. Каждый фермент воздействует лишь на определенное вещество или группу веществ, близких по своей структуре. Различают следующие виды специфичности: а) абсолютную, когда ферменты катализируют лишь одну реакцию превращения какого-либо вещества. Например, уреаза (карбамид - амидогидролаза) катализирует только реакцию гидролитического расщепления мочевины до аммиака и двуокиси

углерода; б) групповую, когда ферментом катализируются реакции превращения близких по своей структуре веществ, построенных по одному типу. Так, сахараза (Р-фруктофуранозидаза) катализирует реакцию гидролитического расщепления сахарозы с освобождением молекул глюкозы и фруктозы, но тот же фермент катализирует также реакцию частичного гидролиза трисахарида рафинозы (а-галактозидо-а-глюкозидо-р-фруктозида), при которой освобождается лишь молекула фруктозы, а связь между галактозой и глюкозой остается ненарушенной; в) стереохимическую, которая проявляется в том, что фермент катализирует реакцию расщепления или синтеза только одного из стереоизомеров, не воздействуя на другой. Окисление L-молочной кислоты до пировиноградной катализируется ферментом лактатдегидрогеназой, тогда как тот же процесс D-молочной кислоты катализируется другим ферментом - -лактатде-гидрогеназой.

Реактивы: а) слюна, разведенная в 10 раз дистиллированной водой; б) сахароза, 1%-ный раствор; в) крахмал, 1%-ный раствор; г) реактивы для реакции Троммера.

В две пробирки наливают по 1 мл разведенной слюны, затем в одну из них добавляют 1 мл раствора сахарозы, а в другую - столько же раствора крахмала. Обе пробирки прогревают 10 мин. в водяной бане при температуре 38° С, после чего охлаждают и с содержимым каждой из них проделывают реакцию Троммера. Убеждаются, что амилаза катализировала лишь процесс гидролитического расщепления крахмала и не оказала действия на сахарозу.

Влияние pH среды на активность амилазы слюны.

Каждый фермент проявляет максимум своего каталитического действия при строго определенном pH среды. Наивысшую активность многие ферменты проявляют в изоэлектрической точке.

Оптимальное значение pH для пепсина составляет 1,5-2,0, амилазы слюны -6,8-7,0, трипсина - 7,8, липазы поджелудочной железы - 7,0-7,8. Было, однако, показано, что ферменты, катализирующие одни и те же реакции, но выделенные из различных субстратов, проявляют оптимум действия при неодинаковых значениях pH. Так, оптимум действия кишечной сахаразы наблюдается

при pH 6,2, а сахаразы, выделенной из дрожжей, - при pH 4,6-5,0. Оптимум pH амилазы слюны составляет 6,8-7,0, а амилаза солода проявляет максимум каталитической активности при pH 4,4-4,5.

Реактивы: а) слюна, разведенная дистиллированной водой в 100 раз; б) крахмал, 0,5%-ный раствор; в) лимонная кислота, 0,1 М раствор (19,212 г кислоты в 1 л); г) фосфорнокислый натрий двузамещенный М раствор (содержит 36,62 г соли в 1 л); д) раствор Люголя (раствор иода в иодистом калии); е) хлористый натрий, 1%-ный раствор.

В 7 однотипных пробирок пипетками наливают растворы лимонной кислоты и фосфорнокислого натрия в количествах, указанных в табл. 4, получая таким образом буферные смеси со значениями pH от 5,6 до 8,0. В каждую пробирку добавляют по 10 капель 1 %-ного раствора хлористого натрия, 0,5%-ного раствора крахмала, разведенной в 100 раз слюны и перемешивают.

Табл. 4. Фосфатно-цитратные буферные смеси

Пробирки ставят на 10 мин. в водяную баню при температуре 38° С, после чего быстро охлаждают, добавляют во все пробирки по 1 капле раствора Люголя, перемешивают и наблюдают окраску. Устанавливают, при каком pH произошло наиболее полное расщепление крахмала (желтая или буровато-желтая окраска с иодом). Реакция весьма специфична и показательна.